Aplicações

Determinação de resíduos de piridaben em alimentos pelo GCMS

Setembro 14, 2023

Princípio
Os resíduos de piridaben foram extraídos com acetato de acetato ou acetonitrila, purificado por uma cromatografia de permeação em gel (GPC) ou SPE, determinada por GC-ECD e confirmação por GC-MS.

Reagentes e materiais
Todos os reagentes utilizados devem ser analiticamente puros, a menos que especificado de outra forma.
1. Acetato de etila: grau HPLC.
2. Ciclohexano: grau de HPLC.
3. Acetonitrila: grau HPLC
4. Hexano: grau HPLC.
5. Triclorometano: grau de HPLC.
6. Sulfato de sódio anidro;
4 h e mantido em um recipiente bem fechado.
7. Cloreto de sódio.
8. Acetato de etila + ciclohexano (1 + 1, V/V).
9. hexano + triclorometano (9 + 1,V/V).
10. ciclohexano + acetato de etila (6 + 1, V/V)
11. Padrão de piridaben (Piridaben: CAS No. 96489-71-3: Fórmula Molecular C19H25CIN2OS; Peso Molecular: 364. 93; Pure: 99%).
12. Standard stock solution: Accurately weigh a certain amount of pyridaben standard and dis- solve it in a small volume of ethyl acetate. Dilute with Ethyl acetate to make the standard stock solution of 100 mg/L. It should be stored in a refrigerator at 0℃~4℃.
13. Solução de trabalho padrão: depois dilua a solução padrão com acetato de etila na concentração necessária como a solução de trabalho padrão.
14. Carbon-psa-tubo: 1ml, 50mg, ativo com 3ml de acetonitrila + acetato de etila (10)
15. HLB SPE Tubos: 3 ml, 60 mg ou equivalente.
(9), 2 ml de triclorometano e 5 ml de água destilada antes de começar.
16. Film: 0.45 μm.

Aparelho e equipamento
1. Cromatografia gasosa: equipado com ECD
2. Cromatografia gasosa: equipada com espectrometria de massa de ionização por elétrons.
3. Equilíbrio analítico: sentido de 0,01 g.
4. Equilíbrio analítico: sentido de 0,1 mg
5. Cromatógrafo de permeação em gel equipado com bomba isocrática e coletor de fração.
6. Centrífuga: 4 000 r/min.
7. Evaporador de vácuo rotativo
8. Coluna do sulfato de sódio anidro: 7,5 cm x 1,5 cm (i. D.) Sulfato de sódio anidro cheio de combustível com algodão absorvente de 5 cm.
9. Mixer de vórtice.
10. Máquina ultrassônica.
11. Homogenizer.
12. 50 ml de tubo de centrífuga plástica rolhada.

Preparação e armazenamento da amostra de teste
Preparação da amostra de teste
1. Cereais e chá
Trimestre a amostra para ca.
2. Frutas e vegetais
A amostra primária combinada é reduzida para ca.

3. Produtos de carne e carne, nozes
Tome representante aproximadamente 1 kg de amostra.

Armazenamento de amostras de teste
The test samples of cereals, tea, nuts, vinegar, honey and honey products should be stored between 0℃~4℃. The test samples of other one should be stored below -18℃. While sampling and sam- ple preparation, precaution must be taken to avoid contamination or any factors that may cause the change of residue content

Procedimento
Extração
1. Vegetais, frutas.
Weight 10 g (accurate to 0. 01 g) of the test sample into a 50 mL stoppered plastic centrifuge tube, then add 20 mL ethyl acetate + cyclohexane extracted with homogenize at 100oor/min for 1 min, then centrifuge at 4000/min for 3 min, transfer the supernatant to another clean tube, and repeat the extraction procedure with 20 mL ethyl acetate + cyclohexane again. The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water, collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40 ℃ water bath. Dissolve the residue with 10.0 mL of ethyl acetate cyclohexane, filter through 0. 45 um membrane filter and wait for purification.

2. Walnut.
Weight 10 (accurate to 0. 01 g) of the test sample into a 50 mL stoppered plastic centrifuge tube. then add 20 mL acetonitrile, extracted with homogenizer at 10000 r/min for 1 min. then centrifuge at 4 000 r/min for 3 min, transfer the supernatant to another clean tube, and repeat the extraction procedure with 20 mL Acetonitrile again. The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water. collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40℃ water bath. Dissolve the residue with 10. 0 mL of ethyl acetate + cyclohexane, filter through 0. 45 um membrane filter and wait for purification.

3. Chá e cebola
Peso 2. 5 g (preciso de 0. 01 g) de amostras, em um tubo de centrífuga de plástico rolha de 50 ml, adicione 15 ml de água destilada, fique por 1h.
The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water, collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40℃ water bath. Dissolve the residue with 10.0 mL of ethyl acetate + cyclohexane, filter through 0.45 um membrane filter and wait for purification.

Limpeza
Limpeza de GPC para frutas de vegetais, cereais, nozes, fígado de frango.
1. Condição de operação de GPC
a) Coluna GPC: 300 mm 10 mm (i. d.), Bio BIODS S-X3 ou equivalente:
b) Fase móvel: acetato de ciclohexano-etil (1+1):
c) Caudal: 4,7 mL/min:
d) Volume de injeção no loop de amostra: 5 ml:
e) Tempo de coleta do eluato: 7,5 min ~ 12.

2. Etapa de limpeza de GPC

Transfira a solução adquirida antes para a coluna do GPC com os parâmetros mostrados na primeira etapa.
The elution is collected into a clean tube and evaporated to dryness at 35℃ under a stream of nitrogen and redissolved in 1.0 mL ethyl acetate for determination and conformation.

3. Limpeza SPE para vinagre e mel
Weight 2.5 g of samples into a plastic centrifuge tube, add 5 mL of distilled water and vortex for 30 s. Transfer the above solution into SPE column. control the flow at mL/min. Then elute with 2 mL of distilled water. discard the rinse liquid, make vacuum for 2 min. add 4 mL of Hexane + Trichloromethane. collect the eluates into a 10 mL centrifuge tube ， then evaporated to dryness at 40 ℃ under a stream of nitrogen ，and dissolved with 0.5 mL ethyl acetate for GC-ECD or GC-MS determina-tion.

4. Limpeza de SPE para chá e cebola
Transfer the solution acquired before into Carbon- PSA tube, rinse with 1. 5 mL of Cyclohexane + Ethyl acetate. collect the eluates into centrifuge tube, control the flow at 1 mL/min, then evaporated to dryness at 40 ℃ under a stream of nitrogen. and dissolved with 0. 5 mL ethyl acetate for GC-ECD or GC-MS determination.

Determinação do GC
Condições de operação GC
a) Coluna: DB-1301 30 m 0. 25 mm (i.d.) x 0. 25 um ou equivalente;
b) Column temperature: 50℃ (20℃/min) – 200℃ (5℃/min) – 260℃ (10min) .
c) Temperatura da porta de injeção: 260 C:
d) Temperatura do DCD: 300 C:
e) gás portador: nitrogênio (pureza> 99.999% de vazão: 2 ml {{url_placeholder_0}});
f) Modo de injeção: sem divisão.
g) Volume de injeção: 1 ul.

Determinação do GC
De acordo com a concentração aproximada de resíduos de piridaben em solução de amostra, selecione a solução de trabalho padrão com área de pico semelhante à da solução da amostra.
Sob as condições acima do GC, o tempo de retenção do piridaben é de cerca de 20 anos.

Confirmação do GC-MS
Condições de operação GC-MS
a) Coluna cromatográfica: 30 m x 0. 25 mm (i. d.)
0. 25 espessura do filme e coluna capilar de sílica HP-5MS ou equivalente;
b) Column temperature: 50 ℃ (hold 1 min) (10℃/min) – 280℃ (10min);
c)Injection port temperature: 250 ℃；
d) Interface temperature: 280 ℃;
e) modo de ionização eletrônica: EL;
f) Energia de Lionização: 70 eV:
g) Gás de arraste: Hélio, pureza > 99,999%, caudal 1,0 mL/min:
h) Modo de injeção: sem divisão, abra a válvula após 0.
75 min:
i) Volume de injeção: 1 UL:
j) Modo de determinação: SIM:
k) íons de monitoramento selecionados (m/z): 147, 309, 105:
l) Atraso na proteção do solvente: 5,0 min.

Confirmação do GC-MS
De acordo com a condição operacional acima, analise a solução padrão e a solução de amostra, se houver um pico, apareceu no mesmo tempo de retenção para a solução da amostra e a solução de trabalho padrão.

Teste em branco
O teste em branco será realizado de acordo com os procedimentos acima sem adição de amostra.

Limite de determinação
O limite de determinação de pêssego, pêra, batata de aspargos, trigo sarraceno de milho, mel, vinagre, nozes, carne rubit, carne de frango, camarão, folha de chá, cebola e fígado de frango são 0,01mg/kg

Recuperação
O limite de confirmação e a recuperação deste método: