Principe
Le sélénium dans les échantillons de riz est extrait avec la pronase E en ultrasons.
(NH4)2 HPO4 à 5 mmol/L (pH 6,0). La colonne utilisée pour la spéciation est une colonne échangeuse d'anions. Le détecteur utilisé est le spectrophotomètre atomique à génération d'hydrures PERSEE PF7.
Réactifs et équipements
Instrument et outils:
1. Persee PF7 HEAD METAL Analyzer, avec la lampe à cathode Hollow Selenium, AS4 Auto Sampler, 29619 Spéciation Système avec pompe isocratique
2. Centrifuge à grande vitesse;
3. Ultrasonic;
4. Grinder de café
5. Tamis d'ouverture de 0,850 mm
6. 0,22 Um membrane filtrante aqueuse
7. Alimentation en gaz argon (pureté de 99,99%)
Réactif et produits chimiques:
1. Hydroxyde de potassium (KOH)
2. Acide chlorhydrique (HCL)
3. Borohydride de potassium (KBH4)
4. Iodure de potassium (Ki)
5. (NH4) 2 HPO4 (grade analytique)
6. Eau désionisée
7. Phase mobile: 5 mmol (NH4) 2 HPO4 Ajouter 0,33 g (NH4) 2 hpo4 et 150 acide formique ul dans 500 ml d'eau déionisée.
Substances standard:
Solution standard SE (iv), Solution standard SE (VI), solution standard de sélénométhionine (Semet), solution standard de sélénocystéine (SECYS)
Procédures expérimentales
1. Extraction
Scassez des échantillons de riz et passez-les par tamis d'ouverture de 0,850 mm.
Ensuite, le tube échographique à 37 ° C pendant 30 min.
2. Test
Préparation d'une solution étalon mixte : diluer et mélanger les échantillons étalons de Se(IV), Se(VI), SeMet et SeMet pour obtenir une solution étalon mixte à 1 mg/L (concentrations de Se(IV), Se(VI), SeCys et SeMet) (conserver à 4 °C). Diluer ensuite avec la phase mobile.
Concentrations de 5,0, 25,0, 50,0, 75,0 et 100,0 ng/mL (ou autres concentrations appropriées) progressivement et fraîchement préparées. Injectez-les et effectuez les tests comme indiqué dans [analyse instrumentale]. La séquence d'apparition des quatre pics est présentée ci-dessous :
Figure 1 Référence Séquence d'aspect de différentes espèces de SE sur le chromatogramme.
3. Résultats et calcul
Qualitatif:
Allumez la machine et définissez-la en fonction des paramètres du tableau ci-dessous (paramètres instrumentaux).
Quantitatif:
Injectez 100 UL d'échantillon de solution de test d'échantillons et utilisez un logiciel pour capturer des pics à ces temps de rétention ci-dessus.
Dans lequel:
X-La teneur en substance à mesurer dans l'échantillon, mg/kg
C-La concentration de sélénium inorganique dans la solution d'essai, ng/L
pese d'échantillon m prélevé, g
Volume V de la solution de test, ML
Temps de dilution f
Paramètres instrumentaux
[Revue des résultats]
Voici quelques-uns des résultats que nous obtenons:
Figure 2 Chromatogramme de spéciation du sélénium, de gauche à droite:
Secys et Semet.
Figure 3 Courbe d'étalonnage de SECYS (concentration au niveau PPB)
Figure 4 Courbe d'étalonnage du Semet (concentration au niveau PPB)
