Anwendungen

Bestimmung von Pyridabenresten in Lebensmitteln durch GCMS

14. September 2023

Prinzip
Die Pyridabenreste wurden mit Ethylacetat-Cyclohexan oder Acetonitril extrahiert, durch eine Gelpermeationschromatographie (GPC) oder SPE gereinigt, die durch GC-ECD und Bestätigung durch GC-MS bestimmt wurde.

Reagenzien und Materialien
Alle verwendeten Reagenzien sollten analytisch rein sein, sofern nicht anders angegeben.
1. Ethylacetat: HPLC -Grad.
2. Cyclohexan: HPLC -Grad.
3. Acetonitril: HPLC -Grad
4. Hexan: HPLC -Grad.
5. Trichlormethan: HPLC -Grad.
6. wasserfreies Natriumsulfat;
4 h und in einem dicht geschlossenen Behälter gehalten.
7. Natriumchlorid.
8. Ethylacetat + Cyclohexan (1 + 1,V/V).
9. Hexan + Trichlormethan (9 + 1, V/V).
10. Cyclohexan + Ethylacetat (6 + 1, V/V)
11. Pyridaben Standard (Pyridaben: CAS Nr. 96489-71-3: Molekulare Formel C19H25Cin2OS; Molekulargewicht: 364. 93; rein: 99%).
12. Standard stock solution: Accurately weigh a certain amount of pyridaben standard and dis- solve it in a small volume of ethyl acetate. Dilute with Ethyl acetate to make the standard stock solution of 100 mg/L. It should be stored in a refrigerator at 0℃~4℃.
13. Standardarbeitslösung: Dann die Standard -Stammlösung mit Ethylacetat auf die erforderliche Konzentration als Standardarbeitslösung verdünnen.
14. Carbon-Psa-Rohr: 1 ml, 50 mg, aktiv mit 3ml Acetonitril + Ethylacetat (10)
15. HLB -SPE -Röhren: 3 ml, 60 mg oder gleichwertig.
(9), 2 ml Trichlormethan und 5 ml destilliertes Wasser vor dem Start.
16. Film: 0.45 μm.

Gerät und Ausrüstung
1. Gaschromatographie: Ausgestattet mit ECD
2. Gaschromatographie: Ausgestattet mit Elektronenionisationsmassenspektrometrie.
3. Analytischer Gleichgewicht: Sinn von 0,01 g.
4. Analytisches Gleichgewicht: Sinn von 0,1 mg
5. Gel -Permeation -Chromatograph mit isokratischer Pumpe und Fraktionskollektor.
6. Zentrifuge: 4.000 U/min.
7. Rotary Vakuumverdampfer
8. wasserfreies Natriumsulfatsäule: 7,5 cm x 1,5 cm (d. H. D.) Kraftstoffgefüllte wasserfreie Natriumsulfat bei 5 cm absorbierender Baumwolle.
9. Wirbelmischer.
10. Ultraschallmaschine.
11. Homogenisator.
12. 50 ml abgeschaltete Plastikzentrifugenröhre.

Vorbereitung und Lagerung von Testprobe
Vorbereitung der Testprobe
1. Müsli und Tee
Quartal die Probe nach ca.
2. Obst und Gemüse
Die kombinierte Primärprobe wird auf ca. reduziert.

3. Fleisch und Fleischprodukte, Nüsse
Nehmen Sie Repräsentant ca. 1 kg Probe.

Speicherung von Testproben
The test samples of cereals, tea, nuts, vinegar, honey and honey products should be stored between 0℃~4℃. The test samples of other one should be stored below -18℃. While sampling and sam- ple preparation, precaution must be taken to avoid contamination or any factors that may cause the change of residue content

Verfahren
Extraktion
1. Gemüse, Obst.
Weight 10 g (accurate to 0. 01 g) of the test sample into a 50 mL stoppered plastic centrifuge tube, then add 20 mL ethyl acetate + cyclohexane extracted with homogenize at 100oor/min for 1 min, then centrifuge at 4000/min for 3 min, transfer the supernatant to another clean tube, and repeat the extraction procedure with 20 mL ethyl acetate + cyclohexane again. The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water, collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40 ℃ water bath. Dissolve the residue with 10.0 mL of ethyl acetate cyclohexane, filter through 0. 45 um membrane filter and wait for purification.

2. Walnuss.
Weight 10 (accurate to 0. 01 g) of the test sample into a 50 mL stoppered plastic centrifuge tube. then add 20 mL acetonitrile, extracted with homogenizer at 10000 r/min for 1 min. then centrifuge at 4 000 r/min for 3 min, transfer the supernatant to another clean tube, and repeat the extraction procedure with 20 mL Acetonitrile again. The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water. collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40℃ water bath. Dissolve the residue with 10. 0 mL of ethyl acetate + cyclohexane, filter through 0. 45 um membrane filter and wait for purification.

3. Tee und Zwiebeln
Gewicht 2. 5 g (genau auf 0. 01 g) Proben, in ein 50 -ml -Plastikzentrifugerohr, um 15 ml destilliertes Wasser hinzufügen, 1 Stunde stehen.
The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water, collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40℃ water bath. Dissolve the residue with 10.0 mL of ethyl acetate + cyclohexane, filter through 0.45 um membrane filter and wait for purification.

Aufräumen
GPC-Reinigung für Gemüse-Obst, Müsli, Walnuss, Hühnerleber.
1. GPC Betriebszustand
A) GPC-Säule: 300 mm 10 mm (i. D.), BIO-Perlen S-X3 oder gleichwertig:
B) Mobile Phase: Cyclohexan-Ethylacetat (1+1):
c) Flussrate: 4,7 ml/min:
d) Injektionsvolumen bei Probenschleife: 5 ml:
e) Zeit des Sammelns des Eluates: 7,5 min ~ 12.

2. GPC-Aufräumschritt

Übertragen Sie die zuvor erfasste Lösung in die GPC -Spalte mit den im ersten Schritt gezeigten Parametern.
The elution is collected into a clean tube and evaporated to dryness at 35℃ under a stream of nitrogen and redissolved in 1.0 mL ethyl acetate for determination and conformation.

3. SPE-Aufräumen für Essig und Honig
Weight 2.5 g of samples into a plastic centrifuge tube, add 5 mL of distilled water and vortex for 30 s. Transfer the above solution into SPE column. control the flow at mL/min. Then elute with 2 mL of distilled water. discard the rinse liquid, make vacuum for 2 min. add 4 mL of Hexane + Trichloromethane. collect the eluates into a 10 mL centrifuge tube ， then evaporated to dryness at 40 ℃ under a stream of nitrogen ，and dissolved with 0.5 mL ethyl acetate for GC-ECD or GC-MS determina-tion.

4. SPE-Aufräumen für Tee und Zwiebeln
Transfer the solution acquired before into Carbon- PSA tube, rinse with 1. 5 mL of Cyclohexane + Ethyl acetate. collect the eluates into centrifuge tube, control the flow at 1 mL/min, then evaporated to dryness at 40 ℃ under a stream of nitrogen. and dissolved with 0. 5 mL ethyl acetate for GC-ECD or GC-MS determination.

GC -Bestimmung
GC -Betriebsbedingungen
A) Säule: DB-1301 30 m 0. 25 mm (I.D.) x 0. 25 um oder äquivalent;
b) Column temperature: 50℃ (20℃/min) – 200℃ (5℃/min) – 260℃ (10min) .
c) Injektionsanschlusstemperatur: 260 C:
d) ECD -Temperatur: 300 C:
e) Trägergas: Stickstoff (Reinheit> 99,999% Durchflussrate: 2 ml {{url_placeholder_0}});
f) Injektionsmodus: spaltlos.
g) Injektionsvolumen: 1 ul.

GC -Bestimmung
Wählen Sie gemäß der ungefähren Konzentration der Pyridabenreste in der Probenlösung die Standardarbeitslösung mit ähnlicher Peakfläche wie die Probenlösung aus.
Unter den oben genannten GC -Bedingungen beträgt die Retentionszeit von Pyridaben etwa 20. 9 min.

GC-MS-Bestätigung
GC-MS-Betriebsbedingungen
A) Chromatographische Säule: 30 m x 0. 25 mm (i. d.)
0. 25 UM-Filmdicke und HP-5ms Silica-Kapillarsäule oder gleichwertig;
b) Column temperature: 50 ℃ (hold 1 min) (10℃/min) – 280℃ (10min);
c)Injection port temperature: 250 ℃；
d) Interface temperature: 280 ℃;
e) Elektronenionisationsmodus: EL;
f) Löweenergie: 70 eV:
g) Trägergas: Helium, Reinheit> 99. 999%, Durchflussrate 1,0mL/min:
H) Injektionsmodus: Teilenlos, öffnen Sie das Ventil nach 0.
75 min:
i) Injektionsvolumen: 1 UL:
j) Bestimmungsmodus: SIM:
K) Ausgewählte Überwachungsionen (m/z): 147, 309, 105:
l) Lösungsmittelschutzverzögerung: 5,0 min.

GC-MS-Bestätigung
Analysieren Sie gemäß der obigen Betriebsbedingung die Standardlösung und die Probenlösung, wenn ein Peak für die gleiche Retentionszeit sowohl für die Probenlösung als auch für die Standard -Arbeitslösung auftritt.

Leerer Test
Der leere Test wird gemäß den oben genannten Verfahren ohne Stichprobenanzug durchgeführt.

Bestimmungsgrenze
Die Grenze der Bestimmung von Pfirsich, Birne, Spargelkartoffeln, Mais Buchweizen, Honig, Essig, Walnuss, Rubitfleisch, Hühnerfleisch, Garnelen, Teeblatt, Zwiebel und Hühnerleber beträgt 0,01 mg/kg.

Erholung
Die Bestätigungsgrenze und Wiederherstellung dieser Methode: