Başvuru

GCMS tarafından gıdalarda piridaben kalıntılarının belirlenmesi

EYLUL 14, 2023

İlke
Piridaben kalıntıları, GC-ECD ile belirlenen bir jel geçirgenlik kromatografisi (GPC) veya SPE ile saflaştırılan ve GC-MS tarafından onaylanan etil asetat-sikloheksan veya asetonitril ile ekstrakte edildi.

Reaktifler ve Malzemeler
Kullanılan tüm reaktifler aksi belirtilmedikçe analitik olarak saf olmalıdır.
1. Etil Asetat: HPLC sınıfı.
2. Sikloheksan: HPLC sınıfı.
3. Asetonitril: HPLC sınıfı
4. Heksan: HPLC sınıfı.
5. Triklorometan: HPLC derecesi.
6. Susuz sodyum sülfat;
4 saat ve sıkıca kapalı bir kapta tutuldu.
7. Sodyum klorür.
8. Etil asetat + sikloheksan (1 + 1, V/V).
9. Heksan + triklorometan (9 + 1, V/V).
10. sikloheksan + etil asetat (6 + 1, V/V)
11. Piridaben Standardı (Piridaben: CAS No. 96489-71-3: Moleküler Formül C19H25cin2OS; Moleküler Ağırlık: 364. 93; Saf:).
12. Standart stok çözümü: Belli bir miktar piridaben standardını doğru bir şekilde tartın ve küçük bir hacim etil asetatta çözün.
13. Standart çalışma çözeltisi: Daha sonra standart stok çözeltisini etil asetat ile standart çalışma çözeltisi olarak gerekli konsantrasyona seyreltin.
14. Karbon-PSA-Tüp: 1ml, 50mg, 3ml asetonitril + etil asetat ile aktif (10)
15. HLB spe tüpleri: 3 mL, 60 mg veya eşdeğeri.
(9), başlamadan önce 2 mL triklorometan ve 5 ml damıtılmış su.
16. Film: 0.45 μm.

Aparat ve ekipman
1. Gaz kromatografisi: ECD ile donatılmış
2. Gaz kromatografisi: elektron iyonizasyon kütle spektrometrisi ile donatılmıştır.
3. Analitik denge: 0.01 g duygusu.
4. Analitik denge: 0.1 mg duygusu
5. İzokratik pompa ve fraksiyon koleksiyoncusu ile donatılmış jel permeation kromatografi.
6. Santrifüj: 4000 d/dk.
7. döner vakum buharlaştırıcısı
8. Susuz sodyum sülfat kolonu: 7.5 cm x 1.5 cm (i. D.) 5 cm emici pamuk üzerine yakıtla doldurulmuş susuz sodyum sülfat.
9. Vorteks mikseri.
10. Ultrasonik makine.
11. Homojener.
12. 50 ml Stoppered plastik santrifüj tüpü.

Test örneğinin hazırlanması ve depolanması
Test örneğinin hazırlanması
1. Tahıllar ve Çay
Örneğin ca.
2. Meyve ve Sebzeler
Birleşik birincil numune ca.

3. Et ve et ürünleri, fındık
Temsilciyi yaklaşık 1 kg örnek alın.

Test örneklerinin depolanması
Tahıl, çay, fındık, sirke, bal ve bal ürünlerinin test örnekleri 0 ℃ ~ 4 ℃ arasında saklanmalıdır.

Prosedür
Çıkarma
1. Sebzeler, meyveler.
50 mL'lik tıpalı plastik santrifüj tüpüne 10 g (0,01 g hassasiyette) test numunesi tartılır, sonra 100oor/dk'da 1 dakika homojenize edilerek ekstrakte edilen 20 mL etil asetat + siklohekzan eklenir, sonra 4000/dk'da 3 dakika santrifüj edilir, süpernatantı başka bir temiz tüpe aktarılır ve ekstraksiyon prosedürü tekrar 20 mL etil asetat + siklohekzan ile tekrarlanır. Süpernatanlar suyu uzaklaştırmak için susuz sodyum sülfat kolonundan geçirilir, efluant 150 mL'lik konsantre şişeye toplanır ve 40 ℃'lik su banyosu olan döner buharlaştırıcı ile neredeyse kuruyana kadar yoğunlaştırılır. Kalıntıyı 10,0 mL etil asetat siklohekzan ile çözün, 0,45 um'lik membran filtreden süzün ve arınmayı bekleyin.

2. Ceviz.
Test örneğinin ağırlığı 10 (0. 01 g'a kadar) 50 mL'lık bir durdurulmuş plastik santrifüj tüpüne.

3. Çay ve Soğan
Ağırlık 2. 5 g (0. 01 g'a doğru), 50 mL'lik durdurulmuş plastik santrifüj tüpüne, 15 mL damıtılmış su ekleyin, 1 saat durun.
Süpernatanlar, suyu çıkarmak için susuz sodyum sülfat kolonundan geçirilir, atık su 150 mL konsantre bir şişeye toplanır ve 40 ℃ su banyosuna sahip bir döner buharlaştırıcı tarafından neredeyse kurumaya yoğunlaşır.

Temizleme
Sebze meyveleri, tahıllar, ceviz, tavuk karaciğeri için GPC temizleme.
1. GPC çalışma koşulu
A) GPC Sütunu: 300 mm 10 mm (i. D.), biyo boncuklar S-X3 veya eşdeğeri:
b) Mobil faz: sikloheksan-etil asetat (1+1):
c) Akış hızı: 4. 7 mL/min:
d) Örnek döngüsünde enjeksiyon hacmi: 5 ml:
e) Elüatın toplanma zamanı: 7.5 dk ~ 12.

2. GPC temizleme adımı

Daha önce elde edilen çözümü ilk adımda gösterilen parametrelerle GPC sütununa aktarın.
Elüsyon temiz bir tüpe toplanır ve bir azot akışı altında 35 ℃'de kuruluk için buharlaştırılır ve belirleme ve konformasyon için 1.0 mL etil asetat içinde yeniden çözülür.

3. Sirke ve bal için SPE temizleme
Ağırlık 2.5 g numuneler plastik bir santrifüj tüpüne, 5 mL damıtılmış su ve 30 saniye için girdap ekleyin.

4. Çay ve soğan için SPE temizleme
Daha önce elde edilen çözeltiyi karbon pSA tüpüne aktarın, 1,5 mL sikloheksan + etil asetat ile durulayın.

GC tespiti
GC çalışma koşulları
A) Sütun: DB-1301 30 m 0. 25 mm (i.d.) x 0. 25 um veya eşdeğeri;
B) Kolon Sıcaklığı: 50 ℃ (20 ℃/dakika) - 200 ℃ (5 ℃/dakika) - 260 ℃ (10 dakika).
c) Enjeksiyon bağlantı noktası sıcaklığı: 260 c:
D) ECD Sıcaklığı: 300 C:
e) Taşıyıcı Gaz: Azot (saflık>% 99.999 akış hızı: 2 mL {{url_placeholder_0}});
f) Enjeksiyon modu: bölünmez.
g) Enjeksiyon hacmi: 1 ul.

GC tespiti
Numune çözeltisindeki piridaben kalıntılarının yaklaşık konsantrasyonuna göre, numune çözeltisininkine benzer pik alanı olan standart çalışma çözeltisini seçin.
Yukarıdaki GC koşulları altında, piridabenin tutma süresi yaklaşık 20. 9 dakikadır.

GC-MS Onayı
GC-MS Çalışma Koşulları
A) Kromatografik sütun: 30 m x 0. 25 mm (i. D.)
0. 25 um film kalınlığı ve HP-5MS silika kılcal kolon veya eşdeğeri;
B) Kolon Sıcaklığı: 50 ℃ (1 dakika tutun) (10 ℃/dk) - 280 ℃ (10 dakika);
c) Enjeksiyon bağlantı noktası sıcaklığı: 250 ℃；
d) Arayüz sıcaklığı: 280 ℃;
e) elektron iyonizasyon modu: EL;
f) Lionizasyon Enerjisi: 70 eV:
G) Taşıyıcı Gaz: Helyum, Saflık> 99.9, akış hızı 1.0 mL/min:
h) Enjeksiyon modu: Bölünmez, 0'dan sonra valfi açın.
75 dk:
i) Enjeksiyon Hacmi: 1 UL:
J) Tespit Modu: SIM:
K) Seçilen izleme iyonları (m/z):147, 309, 105:
l) Solvent koruma gecikmesi: 5.0 dakika.

GC-MS Onayı
Yukarıdaki çalışma koşuluna göre, hem numune çözeltisi hem de standart çalışma çözeltisi için aynı tutma süresinde bir tepe noktası ortaya çıkmışsa, standart çözelti ve numune çözeltisini analiz edin.

Boş test
Boş testi, numune eklenmeden yukarıdaki prosedürlere göre yapılacaktır.

Kararlılık sınırı
Şeftali, armut, kuşkonmaz patates, mısır karabuğday, bal, sirke, ceviz, rubit eti, tavuk eti, karides, çay yaprağı, soğan ve tavuk karaciğerinin tayin limiti 0,01 mg/kg'dır.

İyileşmek
Bu yöntemin onay sınırı ve geri kazanımı: