Search
Close this search box.

ข่าว

โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC): หลักการและการใช้งาน

โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC)

โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) ย่อมาจากวิธีการวิเคราะห์ที่ขาดไม่ได้ที่ใช้ในหลายภาคส่วนเพื่อแยกลักษณะและวัดองค์ประกอบภายในส่วนผสมที่ซับซ้อน

พื้นฐานของเทคโนโลยี HPLC

HPLC แสดงให้เห็นถึงเทคนิคที่ปรับตัวได้สูงทำให้สามารถตรวจสอบสารที่หลากหลายได้อย่างพิถีพิถัน

รากฐานทางทฤษฎีที่จำเป็น

การเรียนรู้การดำเนินงาน HPLC ต้องใช้ความคุ้นเคยกับหลักการพื้นฐาน

พลวัตแยก

ความสามารถหลักของเทคนิคอยู่ในการแยกโมเลกุล

การโต้ตอบเฟส

ตัวทำละลายเฟสเคลื่อนที่เคลื่อนย้ายวิเคราะห์ผ่านคอลัมน์การแยกในขณะที่สารตั้งต้นที่อยู่กับที่ (โดยทั่วไปแล้ววัสดุที่เป็นของแข็งหรือที่ดัดแปลงจากพื้นผิว) จะประกอบกับส่วนประกอบตัวอย่าง

ส่วนประกอบเครื่องมือที่สำคัญ

เครื่องมือ HPLC รวมองค์ประกอบสำคัญหลายอย่างที่ทำงานร่วมกันเพื่อให้แน่ใจว่าผลลัพธ์ที่ถูกต้อง

กลไกการส่งของเหลว

ปั๊มที่มีความแม่นยำรักษาอัตราการไหลและความดันของตัวทำละลายคงที่

ตัวอย่างพอร์ตแนะนำ

ระบบการฉีดจะแนะนำปริมาณตัวอย่างนาทีอย่างแม่นยำในกระแสการเคลื่อนที่

คอลัมน์แยก

คอลัมน์ที่บรรจุซึ่งมีสื่อที่อยู่กับที่ทำหน้าที่เป็นไซต์แยกหลัก

ระบบตรวจจับ

หน่วยตรวจจับระบุและหาปริมาณสารประกอบที่ถูกแยกออกจากกัน

หน่วยประมวลผลข้อมูล

ซอฟต์แวร์ขั้นสูงแปลงสัญญาณเครื่องตรวจจับเป็นข้อมูลโครมาโตกราฟี

รูปแบบวิธีการ HPLC

มีเทคนิค HPLC ที่หลากหลายแต่ละแบบปรับให้เหมาะสมสำหรับความต้องการการวิเคราะห์เฉพาะ

วิธีการย้อนกลับเฟส

วิธีการนี้ใช้ขั้นตอนที่ไม่เข้ากับระบบที่ไม่เข้ากับระบบพร้อมเฟสมือถือขั้วโลก

เทคนิคเฟสปกติ

ใช้เฟสที่อยู่กับที่ขั้วกับตัวทำละลายที่ไม่ได้เป็นโพลาร์วิธีนี้มีความเชี่ยวชาญในการแยกสารประกอบน้ำที่ชอบน้ำและโมเลกุลอินทรีย์บางอย่าง

การเปลี่ยนแปลงการแลกเปลี่ยนไอออน

เทคนิคนี้แยกสปีชีส์ที่มีประจุออกจากการปฏิสัมพันธ์ไฟฟ้าสถิตกับสื่อที่อยู่กับที่

วิธีการยกเว้นขนาด

การแยกโมเลกุลโดยปริมาตรอุทกพลศาสตร์วิธีนี้จะทำให้โมเลกุลขนาดใหญ่ขึ้นก่อน

โปรโตคอลการปฏิบัติงานมาตรฐาน

การดำเนินการวิเคราะห์ HPLC เป็นไปตามลำดับขั้นตอนที่กำหนดไว้

การปรับสภาพตัวอย่าง

ก่อนการวิเคราะห์ตัวอย่างจะต้องมีการสลายตัวในตัวทำละลายหรือการกรองที่เหมาะสมเพื่อลบสสารอนุภาค

การฉีดและแยก

หลังจากการเตรียมการตัวอย่างจะป้อนสตรีมเฟสมือถือโดยการย้ายผ่านคอลัมน์การแยกที่เกิดการแบ่งพาร์ติชันส่วนประกอบ

การตรวจจับและการตีความข้อมูล

สารประกอบ Eluting ลงทะเบียนกับระบบตรวจจับสร้างข้อมูลการวิเคราะห์

พารามิเตอร์การเพิ่มประสิทธิภาพ

ตัวแปรหลายตัวมีผลต่อคุณภาพเอาต์พุต HPLC

ลักษณะประสิทธิภาพของคอลัมน์

ประสิทธิภาพของคอลัมน์ที่กำหนดโดยพารามิเตอร์คุณภาพและพารามิเตอร์มิติส่งผลกระทบอย่างยิ่งต่อความสามารถในการแยก

การเพิ่มประสิทธิภาพเฟสมือถือ

องค์ประกอบของตัวทำละลายส่งผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อการแบ่งพาร์ติชันแบบผสม

กฎระเบียบความร้อน

อุณหภูมิมีผลต่อความหนืดเฟสมือถือและการเปลี่ยนแปลงของการโต้ตอบเฟส

การพิจารณาอัตราการไหล

ความเร็วเฟสเคลื่อนที่มีผลต่อระยะเวลาการแยกและความละเอียด

แอปพลิเคชันที่ใช้งานได้จริง

ความสามารถในการปรับตัวของ HPLC ทำให้มันมีค่ามากในหลายสาขาวิชาแก้ปัญหาการวิเคราะห์ที่หลากหลาย

การประกันคุณภาพยา

การพัฒนายาและการควบคุมคุณภาพใช้ HPLC อย่างกว้างขวางสำหรับการประเมินความบริสุทธิ์การทดสอบเสถียรภาพและการวิเคราะห์สูตรเพื่อให้เป็นไปตามข้อกำหนดด้านกฎระเบียบ

การตรวจสอบด้านสิ่งแวดล้อม

HPLC อำนวยความสะดวกในการตรวจหาสารปนเปื้อนด้านสิ่งแวดล้อมรวมถึงสารกำจัดศัตรูพืชและโลหะที่เป็นพิษในเมทริกซ์ต่างๆสนับสนุนความพยายามในการป้องกันระบบนิเวศ

แอพพลิเคชั่นอุตสาหกรรมอาหาร

โปรแกรมความปลอดภัยด้านอาหารใช้ HPLC สำหรับการตรวจคัดกรองสารเติมแต่งการตรวจจับสารปนเปื้อนและการวิเคราะห์ทางโภชนาการเพื่อให้แน่ใจว่าการคุ้มครองผู้บริโภคและการปฏิบัติตามกฎระเบียบ

การตรวจสอบทางชีวการแพทย์

นักวิจัยใช้ HPLC เพื่อศึกษา macromolecules ทางชีวภาพและเมตาโบไลต์พัฒนาความเข้าใจเกี่ยวกับกระบวนการทางสรีรวิทยาและกลไกโรค

ความก้าวหน้าทางเทคโนโลยี

นวัตกรรม HPLC อย่างต่อเนื่องให้การปรับปรุงความเร็วความไวและความเป็นมิตรกับผู้ใช้

ระบบประสิทธิภาพสูงเป็นพิเศษ

เทคโนโลยี UHPLC ใช้ขนาดอนุภาคที่ลดลงและแรงกดดันที่สูงขึ้นเพื่อให้เกิดการแยกความละเอียดสูงอย่างรวดเร็วเหมาะสำหรับการวิเคราะห์ที่สำคัญหรือซับซ้อน

เทคนิคคู่

การรวมกันของสเปกโตรเมตรี HPLC-mass ขยายขีดความสามารถในการตรวจจับซึ่งเป็นเครื่องมือที่ทรงพลังสำหรับการวิเคราะห์ผสมที่ซับซ้อน

การรวมระบบอัตโนมัติ

ระบบร่วมสมัยรวมฟังก์ชั่นอัตโนมัติและซอฟต์แวร์ที่ซับซ้อนลดการแทรกแซงด้วยตนเองและลดข้อผิดพลาดในการดำเนินงาน

Persee: HPLC Solutions Provider

พันธมิตรที่เชื่อถือได้

ห้องปฏิบัติการต้องการเครื่องมือและการสนับสนุน HPLC ที่เชื่อถือได้ บริการ. เพอร์สซัพพลายเออร์ที่มีชื่อเสียงมอบระบบ HPLC ที่มีความแม่นยำด้วยการสร้างที่มีความแม่นยำพร้อมการก่อสร้างที่แข็งแกร่ง พันธมิตรที่เชื่อถือได้ สำหรับห้องปฏิบัติการวิเคราะห์

คำถามที่พบบ่อย

ตัวอย่างประเภทใดที่เข้ากันได้กับ HPLC?

HPLC รองรับกลุ่มตัวอย่างมากมายรวมถึงสารประกอบยาตัวอย่างสิ่งแวดล้อมผลิตภัณฑ์อาหารและวัสดุชีวภาพเช่นโปรตีนหรือผลิตภัณฑ์เมตาบอลิซึม

วิธีเลือกวิธีการ HPLC ที่เหมาะสมอย่างไร

การเลือกวิธีการพิจารณาลักษณะการวิเคราะห์เช่นขั้วและประจุ

ทำไมต้องเน้นการเตรียมตัวอย่าง?

การปรับสภาพตัวอย่างที่เหมาะสมช่วยให้มั่นใจได้ถึงความเข้ากันได้ของระบบป้องกันความเสียหายของคอลัมน์และปรับปรุงความแม่นยำของผลลัพธ์ผ่านการกำจัดอนุภาคและการละลายที่เหมาะสม

 

ติดต่อสื่อ

พบกับผู้เชี่ยวชาญ

ข่าวเพิ่มเติม

thThai