Цели эксперимента
По экспериментам, изучите основные принципы хроматографического анализа и основную работу инструмента и понимайте процесс анализа данных.
Узнайте о хроматографических количественных методах и сравните преимущества и недостатки различных методов.
ВЭЖХ ВВЕДЕНИЕ
Высокая скорость: ВЭЖХ использует инфузионное оборудование высокого давления, скорость потока значительно увеличивается, и скорость анализа чрезвычайно быстрая, в целом всего несколько минут;
Эффективно: частицы наполнителя очень тонкие и регулярные, покрытие на стационарной фазе однородное, а сопротивление массопереноса невелика, поэтому эффективность колонны очень высока.
Высокая чувствительность: детектор чрезвычайно чувствителен: УФ-10-9G, детектор флуоресценции- 10-11G.
Сравнение ВЭЖХ с GC
Объект и объем анализа: анализ GC ограничен газами и стабильными соединениями с низким содержанием кукол, которые составляют только 20% от общего органического вещества;
Выбор мобильной фазы: GC использует ограниченные дополнительные виды «инертных» газов в качестве мобильной фазы, носите только небольшое влияние на компоненты.
Рабочая температура: GC требует высоких температур;
Поля приложения
Благодаря своей высокой чувствительности, количественной точности и подходящей для анализа не летучих и термически нестабильных компонентов, анализ разделения ВЭЖХ чрезвычайно универсален в промышленных и научных исследованиях, особенно в биологии и медицине.
ВЭЖХ состоит из насосной системы, системы впрыска, системы разделения, детектора и системы обработки данных.
Инфузионная система высокого давления
1) Подвижная фазовая бутылка: стеклянная бутылка 1-2 л с растворительным фильтром (сплав Ni), его поры составляют приблизительно 2 мкм, что предотвращает перекачивание частиц.
2) Дегассер: ультразвуковое дегазацию или вакуумное нагревание.
3) Насос высокого давления: требования к инфузионному насосу: хорошее уплотнение, стабильный поток без притока, широкий регулируемый диапазон и коррозионная стойкость.
Эксперимент
Экспериментальные условия
1) Внедрить 10 мкл Смешайте стандартные растворы (метиловый парабен, пропиловый парабен и бутиловый парабен) в различное соотношение подвижных фаз метанола: вода = 90:10, 80:20 и 70:30, чтобы проверить время задержки записи и разрешение между различными компонентами, с разрешением, превышающим 1,5 и кратчайшее время удержания в качестве основного мобильного фазы.
Примечание. Каждый раз, когда вы меняете мобильную фазу, вам нужно подождать около 5 минут, чтобы сбалансировать хроматографическую систему (как линии сигнала, так и давления сбалансированы).
2) Введите 10 мкл Смешайте стандартные растворы (метиловый парабен, пропиловый парабен и бутиловый парабен) в различных скоростях потока мобильной фазы 0,8, 1,0 и 1,5 мл {{url_placeholder_0}} и оптимальный анализ инъекции мобильных фазовых коэффициентов, один и тот же принцип выбрал наилучшую скорость потока мобильной фазы.
Качественный анализ
В оптимальных экспериментальных условиях вводят по 10 мкл каждый из метилового парабена, пропилового парабена и бутилового парабена, и регистрируется время удержания каждого пика.
Количественный анализ
Калибровочная кривая
В оптимальных условиях эксперимента 2, 5, 8, 10, 15 и 20 мкл смешанного стандартного образца вводили и проанализировали, а стандартная кривая определяется объемом впрыска и площадью пика.
Требуется, чтобы коэффициент корреляции этой кривой превышал 0,99.
Неизвестный анализ образца
Введите 10 мкл Неизвестный образец для проверки, количественный анализ с помощью калибровочной кривой.
Вопросы
Основываясь на экспериментальных данных, обсудите различия в методах анализа между газовой хроматографией и жидкой хроматографией.
Исследуйте значение приложения анализа ВЭЖХ.
Подходит ли УФ -детектор для обнаружения всего органического соединения?
