Aplikasi

Penentuan residu piridaben dalam makanan oleh GCMS

14 September 2023

Prinsip
Residu piridaben diekstraksi dengan etil asetat-sikloheksana atau asetonitril, dimurnikan dengan kromatografi permeasi gel (GPC) atau SPE, yang ditentukan oleh GC-ECD dan konfirmasi oleh GC-MS.

Reagen dan bahan
Semua reagen yang digunakan harus murni secara analitik kecuali ditentukan lain.
1. Ethyl Acetate: Kelas HPLC.
2. Cyclohexane: HPLC Grade.
3. Asetonitril: Kelas HPLC
4. Hexane: HPLC Grade.
5. Trichloromethane: HPLC Grade.
6. Sodium sulfat anhidrat;
4 jam dan disimpan dalam wadah yang tertutup rapat.
7. Sodium klorida.
8. Ethyl Acetate + cyclohexane (1 + 1, V/V).
9. Hexane + trichloromethane (9 + 1, V/V).
10. Cyclohexane + ethyl acetate (6 + 1, V/V)
11. Standar Pyridaben (Pyridaben: CAS No. 96489-71-3: Formula Molekul C19H25CIN2OS; berat molekul: 364. 93; murni: 99%).
12. Solusi Stok Standar: Secara akurat menimbang sejumlah standar Pyridaben dan menyelesaikannya dalam volume kecil etil asetat.
13. Solusi Kerja Standar: Kemudian encerkan larutan stok standar dengan etil asetat ke konsentrasi yang diperlukan sebagai solusi kerja standar.
14. Karbon-PSA-tabung: 1ml, 50mg, aktif dengan asetonitril 3ml + etil asetat (10)
15. Tabung SPE HLB: 3 mL, 60 mg, atau setara.
(9), 2 mL trichloromethane dan 5 ml air suling sebelum memulai.
16. Film: 0,45 μm.

Peralatan dan Peralatan
1. Kromatografi Gas: Dilengkapi dengan ECD
2. Kromatografi gas: Dilengkapi dengan spektrometri massa ionisasi elektron.
3. Keseimbangan analitik: rasa 0,01 g.
4. Keseimbangan analitik: rasa 0,1 mg
5. Kromatografi permeasi gel yang dilengkapi dengan pompa isokratis dan kolektor fraksi.
6. Sentrifus: 4.000 putaran/menit.
7. Evaporator Vakum Rotary
8. Kolom natrium sulfat anhidrat: 7,5 cm x 1,5 cm (i. D.) Bahan bakar diisi natrium sulfat anhidrat pada kapas penyerap 5 cm.
9. Vortex Mixer.
10. Mesin Ultrasonik.
11. Homogenizer.
12. 50 mL Tabung centrifuge plastik stoppered.

Persiapan dan penyimpanan sampel uji
Persiapan Sampel Uji
1. Sereal dan teh
Kuartal sampel ke ca.
2. Buah dan sayuran
Sampel primer gabungan dikurangi menjadi ca.

3. Produk daging dan daging, kacang -kacangan
Ambil perwakilan sekitar 1 kg sampel.

Penyimpanan Sampel Uji
Sampel uji sereal, teh, kacang -kacangan, cuka, produk madu dan madu harus disimpan antara 0 ℃ ~ 4 ℃.

Prosedur
Ekstraksi
1. Sayuran, buah -buahan.
Timbang 10 g (akurat hingga 0,01 g) sampel uji ke dalam tabung sentrifus plastik bersumbat 50 mL, lalu tambahkan 20 mL etil asetat + sikloheksana yang diekstraksi dengan homogenisasi pada 100oor/menit selama 1 menit, lalu sentrifus pada 4000/menit selama 3 menit, pindahkan supernatan ke tabung bersih lainnya, dan ulangi prosedur ekstraksi dengan 20 mL etil asetat + sikloheksana lagi. Supernatan dilewatkan melalui kolom natrium sulfat anhidrat untuk menghilangkan air, kumpulkan efluen ke dalam botol konsentrat 150 mL dan kondensasi hingga hampir kering dengan evaporator putar dengan penangas air 40 ℃. Larutkan residu dengan 10,0 mL etil asetat sikloheksana, saring melalui filter membran 0,45 um dan tunggu pemurnian.

2. Walnut.
Berat 10 (akurat hingga 0. 01 g) dari sampel uji ke dalam tabung centrifuge plastik 50 mL yang ditutup.

3. Teh dan Bawang
Berat 2. 5 g (akurat hingga 0. 01 g) dari sampel, menjadi tabung sentrifuge plastik 50 mL yang ditutup, tambahkan 15 mL air suling, berdiri selama 1 jam.
Supernatan dilewatkan melalui kolom natrium sulfat anhidrat untuk menghilangkan air, mengumpulkan limbah ke dalam botol konsentrat 150 mL dan mengembun hingga hampir kering dengan evaporator putar dengan penangas air 40 ℃.

Pembersihan
Pembersihan GPC untuk buah-buahan sayuran, sereal, kenari, hati ayam.
1. Kondisi operasi GPC
A) Kolom GPC: 300 mm 10 mm (i. D.), Bio Beads S-X3 atau setara:
b) Fase gerak: sikloheksana-etil asetat (1+1):
c) laju aliran: 4. 7 ml/min:
d) Volume injeksi pada loop sampel: 5 ml:
e) Waktu Mengumpulkan Eluat: 7,5 menit ~ 12.

2. Langkah Pembersihan GPC

Transfer solusi yang diperoleh sebelum ke kolom GPC dengan parameter yang ditunjukkan pada langkah pertama.
Elusi dikumpulkan ke dalam tabung bersih dan diuapkan hingga kering pada 35 ℃ di bawah aliran nitrogen dan dilarutkan kembali dalam 1,0 mL etil asetat untuk penentuan dan konformasi.

3. SPE Cleaning-Up untuk Cuka dan Madu
Berat 2,5 g sampel ke dalam tabung centrifuge plastik, tambahkan 5 ml air suling dan vortex selama 30 detik.

4. SPE Cleaning-Up untuk Teh dan Bawang
Transfer larutan yang diperoleh sebelum menjadi tabung karbon-PSA, bilas dengan 1. 5 mL sikloheksana + etil asetat.

Penentuan GC
Kondisi operasi GC
A) Kolom: DB-1301 30 M 0. 25 mm (I.D.) x 0. 25 um atau setara;
b) Suhu kolom: 50 ℃ (20 ℃/mnt) - 200 ℃ (5 ℃/mnt) - 260 ℃ (10 menit).
c) Suhu port injeksi: 260 C:
D) Suhu ECD: 300 C:
e) Gas Carrier: Nitrogen (Purity> 99.999% Laju Aliran: 2 ml {{URL_Placeholder_0}});
f) Mode injeksi: Tanpa terpisah.
g) Volume Injeksi: 1 Ul.

Penentuan GC
Menurut perkiraan konsentrasi residu piridaben dalam larutan sampel, pilih solusi kerja standar dengan area puncak yang sama dengan larutan sampel.
Dalam kondisi GC di atas, waktu retensi Pyridaben adalah sekitar 20. 9 menit.

Konfirmasi GC-MS
Kondisi operasi GC-MS
a) Kolom kromatografi: 30 m x 0. 25 mm (i. d.)
0. 25 um ketebalan film, dan kolom kapiler silika HP-5MS atau setara;
b) Suhu kolom: 50 ℃ (tahan 1 menit) (10 ℃/mnt) - 280 ℃ (10 menit);
c) Suhu port injeksi: 250 ℃；
D) suhu antarmuka: 280 ℃;
e) Mode ionisasi elektron: EL;
f) Energi Lionisasi: 70 EV:
g) Gas pembawa: helium, kemurnian> 99. 999%, laju aliran 1.0mL/min:
h) Mode injeksi: Tanpa terpisah, buka katup setelah 0.
75 menit:
i) Volume Injeksi: 1 UL:
J) Mode Penentuan: Sim:
k) ion pemantauan yang dipilih (m/z): 147, 309, 105:
l) Penundaan Perlindungan Pelarut: 5.0 menit.

Konfirmasi GC-MS
Menurut kondisi operasi di atas, analisis solusi standar dan solusi sampel, jika ada puncak yang muncul pada waktu retensi yang sama untuk kedua solusi sampel dan solusi kerja standar.

Tes kosong
Tes kosong akan dilakukan sesuai dengan prosedur di atas tanpa penambahan sampel.

Batas penentuan
Batas penentuan persik, pir, kentang asparagus, soba jagung, madu, cuka, kenari, daging rubit, daging ayam, udang, daun teh, bawang dan hati ayam adalah 0,01 mg/kg.

Pemulihan
Batas konfirmasi dan pemulihan metode ini: