Aplikasi

Penentuan residu piridaben dalam makanan oleh GCMS

14 September 2023

Prinsip
Residu piridaben diekstraksi dengan etil asetat-sikloheksana atau asetonitril, dimurnikan dengan kromatografi permeasi gel (GPC) atau SPE, yang ditentukan oleh GC-ECD dan konfirmasi oleh GC-MS.

Reagen dan bahan
Semua reagen yang digunakan harus murni secara analitik kecuali ditentukan lain.
1. Ethyl Acetate: Kelas HPLC.
2. Cyclohexane: HPLC Grade.
3. Asetonitril: Kelas HPLC
4. Hexane: HPLC Grade.
5. Trichloromethane: HPLC Grade.
6. Sodium sulfat anhidrat;
4 jam dan disimpan dalam wadah yang tertutup rapat.
7. Sodium klorida.
8. Ethyl Acetate + cyclohexane (1 + 1, V/V).
9. Hexane + trichloromethane (9 + 1, V/V).
10. Cyclohexane + ethyl acetate (6 + 1, V/V)
11. Standar Pyridaben (Pyridaben: CAS No. 96489-71-3: Formula Molekul C19H25CIN2OS; berat molekul: 364. 93; murni: 99%).
12. Standard stock solution: Accurately weigh a certain amount of pyridaben standard and dis- solve it in a small volume of ethyl acetate. Dilute with Ethyl acetate to make the standard stock solution of 100 mg/L. It should be stored in a refrigerator at 0℃~4℃.
13. Solusi Kerja Standar: Kemudian encerkan larutan stok standar dengan etil asetat ke konsentrasi yang diperlukan sebagai solusi kerja standar.
14. Karbon-PSA-tabung: 1ml, 50mg, aktif dengan asetonitril 3ml + etil asetat (10)
15. Tabung SPE HLB: 3 mL, 60 mg, atau setara.
(9), 2 mL trichloromethane dan 5 ml air suling sebelum memulai.
16. Film: 0.45 μm.

Peralatan dan Peralatan
1. Kromatografi Gas: Dilengkapi dengan ECD
2. Kromatografi gas: Dilengkapi dengan spektrometri massa ionisasi elektron.
3. Keseimbangan analitik: rasa 0,01 g.
4. Keseimbangan analitik: rasa 0,1 mg
5. Kromatografi permeasi gel yang dilengkapi dengan pompa isokratis dan kolektor fraksi.
6. Sentrifus: 4.000 putaran/menit.
7. Evaporator Vakum Rotary
8. Kolom natrium sulfat anhidrat: 7,5 cm x 1,5 cm (i. D.) Bahan bakar diisi natrium sulfat anhidrat pada kapas penyerap 5 cm.
9. Vortex Mixer.
10. Mesin Ultrasonik.
11. Homogenizer.
12. 50 mL Tabung centrifuge plastik stoppered.

Persiapan dan penyimpanan sampel uji
Persiapan Sampel Uji
1. Sereal dan teh
Kuartal sampel ke ca.
2. Buah dan sayuran
Sampel primer gabungan dikurangi menjadi ca.

3. Produk daging dan daging, kacang -kacangan
Ambil perwakilan sekitar 1 kg sampel.

Penyimpanan Sampel Uji
The test samples of cereals, tea, nuts, vinegar, honey and honey products should be stored between 0℃~4℃. The test samples of other one should be stored below -18℃. While sampling and sam- ple preparation, precaution must be taken to avoid contamination or any factors that may cause the change of residue content

Prosedur
Ekstraksi
1. Sayuran, buah -buahan.
Weight 10 g (accurate to 0. 01 g) of the test sample into a 50 mL stoppered plastic centrifuge tube, then add 20 mL ethyl acetate + cyclohexane extracted with homogenize at 100oor/min for 1 min, then centrifuge at 4000/min for 3 min, transfer the supernatant to another clean tube, and repeat the extraction procedure with 20 mL ethyl acetate + cyclohexane again. The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water, collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40 ℃ water bath. Dissolve the residue with 10.0 mL of ethyl acetate cyclohexane, filter through 0. 45 um membrane filter and wait for purification.

2. Walnut.
Weight 10 (accurate to 0. 01 g) of the test sample into a 50 mL stoppered plastic centrifuge tube. then add 20 mL acetonitrile, extracted with homogenizer at 10000 r/min for 1 min. then centrifuge at 4 000 r/min for 3 min, transfer the supernatant to another clean tube, and repeat the extraction procedure with 20 mL Acetonitrile again. The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water. collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40℃ water bath. Dissolve the residue with 10. 0 mL of ethyl acetate + cyclohexane, filter through 0. 45 um membrane filter and wait for purification.

3. Teh dan Bawang
Berat 2. 5 g (akurat hingga 0. 01 g) dari sampel, menjadi tabung sentrifuge plastik 50 mL yang ditutup, tambahkan 15 mL air suling, berdiri selama 1 jam.
The supernatants are passed through a column of anhydrous sodium sulfate to remove the water, collect the effluent into a 150 mL concentrate bottle and condense to nearly dry by a rotary evaporator with a 40℃ water bath. Dissolve the residue with 10.0 mL of ethyl acetate + cyclohexane, filter through 0.45 um membrane filter and wait for purification.

Pembersihan
Pembersihan GPC untuk buah-buahan sayuran, sereal, kenari, hati ayam.
1. Kondisi operasi GPC
A) Kolom GPC: 300 mm 10 mm (i. D.), Bio Beads S-X3 atau setara:
b) Fase gerak: sikloheksana-etil asetat (1+1):
c) laju aliran: 4. 7 ml/min:
d) Volume injeksi pada loop sampel: 5 ml:
e) Waktu Mengumpulkan Eluat: 7,5 menit ~ 12.

2. Langkah Pembersihan GPC

Transfer solusi yang diperoleh sebelum ke kolom GPC dengan parameter yang ditunjukkan pada langkah pertama.
The elution is collected into a clean tube and evaporated to dryness at 35℃ under a stream of nitrogen and redissolved in 1.0 mL ethyl acetate for determination and conformation.

3. SPE Cleaning-Up untuk Cuka dan Madu
Weight 2.5 g of samples into a plastic centrifuge tube, add 5 mL of distilled water and vortex for 30 s. Transfer the above solution into SPE column. control the flow at mL/min. Then elute with 2 mL of distilled water. discard the rinse liquid, make vacuum for 2 min. add 4 mL of Hexane + Trichloromethane. collect the eluates into a 10 mL centrifuge tube ， then evaporated to dryness at 40 ℃ under a stream of nitrogen ，and dissolved with 0.5 mL ethyl acetate for GC-ECD or GC-MS determina-tion.

4. SPE Cleaning-Up untuk Teh dan Bawang
Transfer the solution acquired before into Carbon- PSA tube, rinse with 1. 5 mL of Cyclohexane + Ethyl acetate. collect the eluates into centrifuge tube, control the flow at 1 mL/min, then evaporated to dryness at 40 ℃ under a stream of nitrogen. and dissolved with 0. 5 mL ethyl acetate for GC-ECD or GC-MS determination.

Penentuan GC
Kondisi operasi GC
A) Kolom: DB-1301 30 M 0. 25 mm (I.D.) x 0. 25 um atau setara;
b) Column temperature: 50℃ (20℃/min) – 200℃ (5℃/min) – 260℃ (10min) .
c) Suhu port injeksi: 260 C:
D) Suhu ECD: 300 C:
e) Gas Carrier: Nitrogen (Purity> 99.999% Laju Aliran: 2 ml {{URL_Placeholder_0}});
f) Mode injeksi: Tanpa terpisah.
g) Volume Injeksi: 1 Ul.

Penentuan GC
Menurut perkiraan konsentrasi residu piridaben dalam larutan sampel, pilih solusi kerja standar dengan area puncak yang sama dengan larutan sampel.
Dalam kondisi GC di atas, waktu retensi Pyridaben adalah sekitar 20. 9 menit.

Konfirmasi GC-MS
Kondisi operasi GC-MS
a) Kolom kromatografi: 30 m x 0. 25 mm (i. d.)
0. 25 um ketebalan film, dan kolom kapiler silika HP-5MS atau setara;
b) Column temperature: 50 ℃ (hold 1 min) (10℃/min) – 280℃ (10min);
c)Injection port temperature: 250 ℃；
d) Interface temperature: 280 ℃;
e) Mode ionisasi elektron: EL;
f) Energi Lionisasi: 70 EV:
g) Gas pembawa: helium, kemurnian> 99. 999%, laju aliran 1.0mL/min:
h) Mode injeksi: Tanpa terpisah, buka katup setelah 0.
75 menit:
i) Volume Injeksi: 1 UL:
J) Mode Penentuan: Sim:
k) ion pemantauan yang dipilih (m/z): 147, 309, 105:
l) Penundaan Perlindungan Pelarut: 5.0 menit.

Konfirmasi GC-MS
Menurut kondisi operasi di atas, analisis solusi standar dan solusi sampel, jika ada puncak yang muncul pada waktu retensi yang sama untuk kedua solusi sampel dan solusi kerja standar.

Tes kosong
Tes kosong akan dilakukan sesuai dengan prosedur di atas tanpa penambahan sampel.

Batas penentuan
Batas penentuan persik, pir, kentang asparagus, soba jagung, madu, cuka, kenari, daging rubit, daging ayam, udang, daun teh, bawang dan hati ayam adalah 0,01 mg/kg.

Pemulihan
Batas konfirmasi dan pemulihan metode ini: