Принцип
Остатки пиридабена экстрагировали этилацетатом-циклогексаном или ацетонитрилом, очищали гелевой хроматографией проникновения (GPC) или SPE, определяемым GC-ECD и подтверждением GC-MS.
Реагенты и материалы
Все используемые реагенты должны быть аналитически чистыми, если не указано иное.
1. Этилацетат: ВЭЖХ класс.
2. Циклогексан: ВЭЖХ класс.
3. ацетонитрил: ВЭЖХ класс
4. Гексан: ВЭЖХ класс.
5. Трихлорметан: ВЭЖХ класс.
6. Безводный сульфат натрия;
4 часа и хранится в плотно закрытом контейнере.
7. Хлорид натрия.
8. этилацетат + циклогексан (1 + 1,V/V).
9. Гексан + трихлорметан (9 + 1, V/V).
10. Циклогексан + этилацетат (6 + 1,V/V)
11. Стандарт пиридабена (Pyridaben: CAS № 96489-71-3: Молекулярная формула C19H25CIN2OS; молекулярная масса: 364. 93; чистый: 99%).
12. Стандартный фондовый раствор: точно взвесить определенное количество стандарта пиридабена и распределить его в небольшом объеме этилацетата.
13. Стандартный рабочий раствор: затем разбавьте стандартный фондовый раствор этилацетатом до требуемой концентрации в качестве стандартного рабочего раствора.
14. Carbon-Psa-Tube: 1 мл, 50 мг, активно с 3 мл ацетонитрила + этилацетата (10)
15. HLB SPE Трубки: 3 мл, 60 мг или эквивалент.
(9), 2 мл трихлорметана и 5 мл дистиллированной воды перед началом.
16. Пленка: 0,45 мкм.
Аппарат и оборудование
1. Газовая хроматография: оснащена ECD
2. Газовая хроматография: оснащена масс -спектрометрией электронов.
3. Аналитический баланс: чувство 0,01 г.
4. Аналитический баланс: чувство 0,1 мг
5. Гелевой проникновение хроматограф, оснащенный изократическим насосом и коллектором фракции.
6. Центрифуга: 4 000 об/мин.
7. Роторный вакуумный испаритель
8. Безводный сульфатный натрий.
9. вихревой микшер.
10. Ультразвуковая машина.
11. Гомогенизатор.
12. 50 мл заподчивая пластиковая центрифужная трубка.
Подготовка и хранение испытательного образца
Приготовление испытательного образца
1. Зерновые и чай
Квартал выборка до ок.
2. Фрукты и овощи
Комбинированный первичный образец уменьшается до ок.
3. Мясо и мясо, орехи
Возьмите представителя примерно 1 кг образца.
Хранение испытательных образцов
Испытательные образцы зерновых, чая, орехов, уксуса, медового и меда должны храниться между 0 ~ 4 ℃.
Процедура
Извлечение
1. Овощи, фрукты.
Взвесьте 10 г (с точностью до 0,01 г) испытуемого образца в 50 мл закупоренную пластиковую центрифужную пробирку, затем добавьте 20 мл этилацетата + циклогексана, экстрагированного гомогенизируйте при 1000 об/мин в течение 1 мин, затем центрифугируйте при 4000 об/мин в течение 3 мин, перенесите супернатант в другую чистую пробирку и повторите процедуру экстракции с 20 мл этилацетата + циклогексана снова. Супернатанты пропускают через колонку с безводным сульфатом натрия для удаления воды, собирают вытекающую жидкость в бутылку для концентрата объемом 150 мл и конденсируют до почти сухого состояния с помощью роторного испарителя с водяной баней 40 ℃. Растворите остаток в 10,0 мл этилацетата + циклогексана, профильтруйте через мембранный фильтр 0,45 мкм и дождитесь очистки.
2. Грецкий орех.
Вес 10 (точный до 0. 01 г) испытательного образца в пробирную пластифужную трубку 50 мл.
3. Чай и лук
Вес 2. 5 г (точный до 0. 01 г) образцов, в пробирку с 50 мл стоплетой пластиковой центрифужной трубки, добавьте 15 мл дистиллированной воды, стоят за 1 час.
Супернатанты проходят через колонну безводного сульфата натрия, чтобы удалить воду, собирайте сточные воды в бутылку концентрата 150 мл и конденсируются почти сухим с помощью вращающегося испарителя с 40 -й водяной ванной.
Уборка
Очистка GPC для овощей, хлопья, грецкий орех, куриная печень.
1. Рабочие условия GPC
а) колонка GPC: 300 мм 10 мм (т. д.), биографические шарики S-X3 или эквивалент:
б) Подвижная фаза: циклогексан-этилацетат (1+1):
в) Скорость потока: 4,7 мл/мин:
г) объем впрыска в петле образца: 5 мл:
e) Время сбора элюата: 7,5 мин. ~ 12.
2. Шаг очистки GPC
Перенесите решение, полученное до столбца GPC с параметрами, показанными на первом этапе.
Элюирование собирается в чистую трубку и испаряется до сухости при 35 ℃ под потоком азота и перерастает в 1,0 мл этилацетата для определения и конформации.
3. Очистка SPE для уксуса и меда
Вес 2,5 г образцов в пластиковую центрифужную трубку, добавьте 5 мл дистиллированной воды и вихря в течение 30 с.
4. Очистка SPE для чая и лука
Перенесите раствор, полученный до углеродной трубки, промойте 1. 5 мл циклогексана + этилацетата.
Определение GC
Условия работы GC
а) столбец: DB-1301 30 м 0. 25 мм (I.D.) x 0. 25 UM или эквивалент;
б) Температура столбца: 50 ℃ (20 ℃/мин) - 200 ℃ (5 ℃/мин) - 260 ℃ (10 минут).
в) Температура порта впрыска: 260 C:
г) температура ECD: 300 C:
e) газ -носитель: азот (чистота> 99,999% Скорость потока: 2 мл {{url_placeholder_0}});
f) Режим инъекции: безразличный.
g) Объем впрыска: 1 уль.
Определение GC
Согласно приблизительной концентрации остатков пиридабена в растворе образца, выберите стандартный рабочий раствор с одинаковой площадью пика, до раствора для образца.
В вышеупомянутых условиях GC время удержания пиридабена составляет около 20. 9 мин.
Подтверждение GC-MS
Условия работы GC-MS
а) Хроматографический столбец: 30 м х 0. 25 мм (т. Д.)
0. 25 UM UM Толщина пленки и капиллярная колонка HP-5 мс или эквивалент;
б) температура столбца: 50 ℃ (удерживает 1 мин) (10 ℃/мин) - 280 ℃ (10 минут);
в) температура порта впрыска: 250 ℃；
г) температура интерфейса: 280 ℃;
e) Режим электронной ионизации: EL;
f) Энергия льота: 70 эВ:
ж) Газ-носитель: гелий, чистота > 99,999%, скорость потока 1,0 мл/мин:
h) Режим инъекции: безразличный, откройте клапан после 0.
75 мин:
i) Объем впрыска: 1 UL:
J) Режим определения: SIM:
k) Выбранные ионы мониторинга (м/з): 147, 309, 105:
L) Задержка защиты растворителя: 5,0 мин.
Подтверждение GC-MS
Согласно приведенному выше условию, проанализируйте стандартное решение и раствор для образца, если есть пик, который появился в одно и то же время удержания как для раствора для образца, так и для стандартного рабочего решения.
Пустой тест
Пустой тест будет проводиться в соответствии с приведенными выше процедурами без добавления образца.
Предел определения
Предел определения персика, груши, спаржи, картофеля, кукурузы, гречихи, меда, уксуса, грецкого ореха, мяса рубина, мяса курицы, креветок, чайного листа, лука и куриной печени составляет 0,01 мг/кг.
Восстановление
Предел подтверждения и восстановление этого метода:
Результаты GCMS
Калибровочная кривая пиридабена, генерируемая стандартами.
Образец 1:
Образец 2:
