Objetivos do experimento
1. Aprenda o princípio e operação do método de análise do espectrofotômetro UV-Vis, aprenda a estrutura do espectrofotômetro UV-Vis.
2. Aprenda o método de análise conservante de alimentos pelo espectrofotômetro UV-vis.
3. Aprenda o método do processo de dados por computador, aprenda a quantificar o conservante em alimentos.
Princípio
1. Análise qualitativa: Diferente comprimento de onda tem absorvância diferente para a amostra, de acordo com o pico de absorvância, o vale da absorvância, o pico do ombro e a absorção da amostra para fazer análises qualitativas.
2. Análise quantitativa: absorvância do composto em aumentos específicos do comprimento de onda na proporção direta à concentração e à distância óptica através da amostra
Lei de Lambert-Beer:
3. Princípio da análise daquantitativa do espectrofotômetro UV-Vis.
4. Condições de teste
Absorbance range: 0.2-0.7Abs
Solução de referência:
Amostra em branco: solvente sem amostra
Célula de referência: o mesmo material e tipo Cuvette que a célula de amostra, emparelhada
Estrutura do espectrofotômetro UV-Vis
Um sistema UV-Vis consiste em fonte de luz, monocromador, suporte de amostra, detector e sistema de sinal.
Fig.1 UV-vis de feixe duplo
Fonte de luz: a lâmpada de tungstênio emite luz 320-2500nm, a lâmpada de deutério emite luz 185 ~ 400 nm
Monocromador: divida luz misturada em luz monocromática, como mostrado na Fig.1.
Detector: receba a luz e converta em sinal elétrico.
De acordo com o caminho óptico do sistema UV-vis, o UV-vis se divide em três tipos diferentes: feixe duplo (Fig. 1), feixe único (Fig.2) e feixe dividido (Fig.3).
Fig.2 Fig.
A feixe única, um único feixe é o sistema óptico mais simples de UV-vis, toda a luz do monocromador através da amostra até o detector.
Feixe dividido, a luz do monocromador é dividida em duas partes, uma viga é através da amostra para o detector; outro feixe chega diretamente ao detector, este feixe é o feixe de referência.
Feixe duplo, a luz do monocromador é dividida em duas partes, um feixe é através da amostra para o detector, outro feixe é através da amostra de referência ao detector.
Experiência - Análise de conteúdo conservante de alimentos em sprite
O ácido benzóico e o ácido sorbico são dois tipos comuns de conservantes de alimentos.
Análise qualitativa de conservante
Pegue o extrato de éter purificado e diluído (ou solução aquosa diluída de sprite), use
Uma cuveta de absorção de 1 cm, com éter dietílico (ou água destilada) como referência, espectro de absorvância de UV no comprimento de onda de 210 ~ 310nm, de acordo com o comprimento de onda de pico de absorção, a intensidade de absorção e os espectros de absorvidos nas amostras de ácido benzóico.
Curva de calibração padrão
Prepare a solução padrão do ácido benzóico (ou ácido sorbico) pesar com precisão 0. 10g de amostra padrão, dissolve -se com éter (ou água), transfira para um balão volumétrico de 25 ml e diluído para o volume.
Soluções padrão de pipeta 0,50 ml, 1,00 ml, 1,50 ml, 2,00 ml e 2,50 ml em cinco frascos volumétricos de 10 ml e diluem para o volume com éter (ou água).
Espectrofotômetro UV-Vis e procedimentos de operação UVWIN
1. Poder no espectrofotômetro de computador e UV-vis.
2. Inicie o software UVWIN para inicialização.
3. Pré-aqueça o instrumento 20min.
4. Após a inicialização, entre na interface de operação, como a figura a seguir mostrada, o software, incluindo cinco funções principais: medição fotométrica, varredura de espectro, análise quantitativa, varredura cinética e varredura SBW.
Varredura de espectro
Análise quantitativa
5. Amostras padrão de teste para criar curva de calibração e calcular a concentração desconhecida da amostra.
6. Após o teste, os dados de saída ou o relatório de teste de impressão e, em seguida, desligam o instrumento e o computador.
Produtos UV-vis de Persee
