Applications

Objectifs de l'expérience
1. Learn UV-VIS Spectrophotometer analysis method principle and operation, learn UV-VIS spectrophotometer’s structure.
2. Apprenez la méthode d'analyse de conservation des aliments par spectrophotomètre UV-Vis.
3. Apprenez la méthode du processus de données par ordinateur, apprenez à quantifier le conservateur dans les aliments.

Principe
1. Analyse qualitative: différentes longueurs d'onde ont une absorbance différente pour l'échantillon, selon le pic d'absorbance, la vallée d'absorbance, le pic d'épaule et l'absorbance de l'échantillon pour effectuer une analyse qualitative.
2. Quantitative analysis: Compound’s absorbance at specific wavelength increases in direct proportion to concentration and optical distance through sample

Loi de Lambert-Beer:

3.Quantitativeanalysis principle of UV-VIS Spectrophotometer.

4. Conditions de test

Absorbance range: 0.2-0.7Abs

Solution de référence:
Échantillon vide: solvant sans échantillon
Cellule de référence: même matériau et cuvette de type que la cellule d'échantillon, appariée

Structure du spectrophotomètre UV-Vis
Un système UV-Vis se compose d'une source lumineuse, d'un monochromateur, d'un support d'échantillon, d'un détecteur et d'un système de signal.

Fig.1 UV-Vis à double faisceau

Source lumineuse: la lampe en tungstène émet une lumière 320-2500 nm, la lampe de deutérium émet une lumière de 185 ~ 400 nm
Monochromateur: diviser la lumière mélangée en lumière monochromatique, comme le montre la figure 1.
Détecteur: Recevez la lumière et convertissez en signal électrique.
Selon le chemin optique du système UV-Vis, le UV-Vis se divise en trois types différents: Double faisceau (Fig. 1), faisceau unique (Fig.2) et faisceau divisé (Fig.3).

Fig.2 Single Beam                                               Fig.3 Split beam

Faisceau unique, un faisceau unique est le système optique le plus simple de Vis UV, toute la lumière du monochromateur à travers l'échantillon au détecteur.
Faisceau divisé, la lumière du monochromateur est divisée en deux parties, une poutre est à travers l'échantillon de détecteur, un autre faisceau arrive directement au détecteur, ce faisceau est un faisceau de référence.
Double poutre, la lumière du monochromateur est divisée en deux parties, une poutre se fait par l'échantillon de détecteur, une autre poutre se fait par l'échantillon de référence au détecteur.

Expérience - Analyse du contenu conservateur alimentaire dans Sprite

Benzoic acid and sorbic acid are two common kinds of food preservatives. Benzoic acid has an aromatic structure and has K absorption band and B absorption band at wavelengths of 228nm and 272nm. Sorbic acid has α, β unsaturated carbonyl structure, and there is a K absorption band of π→π* transition at a wavelength of 255nm. Therefore, according to their UV absorption spectrum characteristics can be qualitatively identified and quantitatively determined.

Analyse qualitative du conservateur

Prenez l'extrait d'éther purifié et dilué (ou une solution aqueuse diluée sprite), utilisez
Une cuvette d'absorption de 1 cm, avec l'éther diéthylique (ou l'eau distillée) comme référence, le spectre d'absorbance UV à une longueur d'onde de 210 ~ 310 nm, selon la longueur d'onde de pointe de l'absorption, l'intensité d'absorption et les spectres d'absorbance de l'échantillon d'acide benzoïque et d'acide sorbique ont été comparés à la détermination du conservateur dans l'échantillon.

Courbe d'étalonnage standard
Prepare benzoic acid (or sorbic acid) standard solution accurately weigh 0. 10g standard sample, dissolve with ether (or water), transfer to a 25mL volumetric flask and dilute to volume. Dilute 1mL of this solution with ether (or water) to 25mL. The standard sample contains 0.16 mg mL-1 as a stock solution. Pipette 5mL of stock solution into a 25mL volumetric flask and make up to a standard concentration of 32μg.mL-1 after constant volume.

Pipette Solutions standard 0,50 ml, 1,00 ml, 1,50 ml, 2,00 ml et 2,50 ml dans cinq flacons volumétriques de 10 ml et diluer au volume avec l'éther (ou l'eau).

Procédures de fonctionnement du spectrophotomètre et UVWIN UV-VIS
1. Alimentation sur l'ordinateur et le spectrophotomètre UV-VIS.
2. Démarrez le logiciel UVWIN à l'initialisation.
3. Pré-chaleur de l'instrument de 20 minutes.
4. Après l'initialisation, entrez dans l'interface de fonctionnement, comme l'image suivant montré, le logiciel comprenant cinq fonctions principales: mesure photométrique, numérisation du spectre, analyse quantitative, balayage cinétique et balayage SBW.

Balayage de spectre

Analyse quantitative

5. Testez des échantillons standard pour créer une courbe d'étalonnage et calculer la concentration d'échantillon inconnue.
6. Après le test, les données de sortie ou le rapport d'essai d'impression, puis éteignez l'instrument et l'ordinateur.

Produits UV-Vis de Persee