Nhiệt sắc loại trừ kích thước (SEC) là một phương pháp mạnh mẽ để phân loại các phân tử theo kích thước. Nó thường được sử dụng trong các nghiên cứu sinh học và y học. Nhưng, các chi tiết khó khăn của nó có thể khiến người mới bắt đầu sợ hãi. Tại PERSEE, chúng tôi nghĩ rằng việc học SEC nên dễ dàng cho tất cả các nhà nghiên cứu. Hướng dẫn này làm cho chromatography loại trừ kích thước đơn giản. Nó giải thích những điều cơ bản, đưa ra những lời khuyên hữu ích và giải quyết các vấn đề phổ biến. Cho dù bạn mới hay có tay nghề, blog này sẽ giúp bạn sử dụng SEC với sự tự tin.
Các nguyên tắc cơ bản của chromatography loại trừ kích thước
Nhãn sắc học loại trừ kích thước phân loại các phân tử theo kích thước và hình dạng của chúng. Các phân tử lớn di chuyển qua cột nhanh hơn. Những cái nhỏ hơn mất nhiều thời gian hơn vì chúng đi qua các lỗ nhỏ của cột. Phương pháp nhẹ nhàng này là tuyệt vời để làm sạch protein, kiểm tra polymer hoặc nghiên cứu tương tác phân tử. Các bộ phận chính bao gồm:
- CộtĐầy hạt có lỗ để tách các phân tử.
- Giai đoạn di động: Một chất lỏng mang mẫu qua.
- Máy dòKiểm tra các phân tử khi chúng xuất hiện, thường với ánh sáng UV.
Biết những điều cơ bản này giúp các nhà nghiên cứu thấy sự linh hoạt và chính xác của SEC trong công việc phòng thí nghiệm.
5 cách để làm cho nhiễm sắc loại trừ kích thước là một chủ đề dễ tiếp cận hơn để hiểu
SEC có thể cảm thấy khó khăn, nhưng năm ý tưởng này làm cho việc học hỏi của các nhà nghiên cứu trở nên dễ dàng hơn.
Loại bỏ nỗi sợ hóa học
Nhiều nhà nghiên cứu lo lắng về SEC vì nó liên quan đến rất nhiều hóa học. Hãy làm cho nó đơn giản bằng cách tập trung vào ý tưởng chính của nó: sắp xếp theo kích thước. Sử dụng các ví dụ, chẳng hạn như lọc các quả bóng qua một lưới, để cho thấy các phân tử lớn hơn xuất hiện trước. Hãy thử các thử nghiệm phòng thí nghiệm dễ dàng để xây dựng sự tự tin.
Lý do cho sự phức tạp của SEC
Phân vỡ các phần khó khăn của SEC thành các ý tưởng đơn giản:
- Kích thước lỗQuyết định các phân tử nào đi vào hạt.
- Đặt hàng thoátCác phân tử lớn hơn rời đi trước, những phân tử nhỏ hơn rời đi sau.
- Sự rõ ràngảnh hưởng đến mức độ phân tử được tách ra.
Giải thích mỗi phần với các ví dụ rõ ràng, như phân loại protein theo trọng lượng, để làm cho nó rõ ràng và có thể liên quan.
Cố gắng tối đa hóa các thực hành xử lý phòng thí nghiệm hoặc tham gia các phiên hình ảnh hóa
Thực hành phòng thí nghiệm và hình ảnh làm cho SEC rõ ràng hơn. Thiết lập thời gian phòng thí nghiệm để thử tải mẫu và thiết lập cột. Sử dụng bản vẽ hoặc video để cho thấy cách các phân tử di chuyển qua cột. Các công cụ này làm cho các ý tưởng khó hiểu hơn.
Sử dụng thực tế của SEC
Hiển thị sử dụng thực sự để chứng minh giá trị của SEC:
- Làm sạch proteinTách enzyme để sản xuất thuốc.
- Kiểm tra polymerNghiên cứu vật liệu nhân tạo.
- Nghiên cứu bệnhNhìn vào các protein liên quan đến bệnh tật.
Liên kết SEC với kết quả thực sự khuyến khích các nhà nghiên cứu tìm hiểu thêm.
Sử dụng mô phỏng phòng thí nghiệm ảo
Các công cụ ảo cho phép các nhà nghiên cứu thử SEC mà không gây hại cho thiết bị. Các chương trình trực tuyến sao chép chọn cột, thêm mẫu và kiểm tra dữ liệu. Những công cụ này giúp các nhà nghiên cứu thoải mái và phạm ít sai lầm hơn trong phòng thí nghiệm thực sự.
Mẹo để đơn giản hóa quy trình nhiễm sắc loại trừ kích thước
Làm cho SEC hoạt động tốt đòi hỏi sự chăm sóc với các công cụ và cài đặt. Những lời khuyên này làm cho quá trình dễ dàng hơn để có kết quả tốt hơn.
Chọn cột phù hợp cho ứng dụng của bạn
Chọn cột đúng là rất quan trọng. Hãy suy nghĩ về:
| Sử dụng | Loại cột | Kích thước lỗ |
| Làm sạch protein | Dựa trên silica | 100–300 Å |
| Kiểm tra polymer | Dựa trên polystyrene | 500–1000 Å |
| Nghiên cứu đường | Dựa trên Agarose | 50–150 Å |
Phù hợp với kích thước lỗ của cột với kích thước phân tử của mẫu của bạn. của chúng tôi Máy chụp sắc tố khí G5GC hoạt động tốt với các thiết lập SEC để có kết quả tốt hơn.
Tối ưu hóa các thông số thí nghiệm để có kết quả tốt hơn
Điều chỉnh các cài đặt này:
- Tốc độ dòng chảyThông thường 0,5-1 ml / phút để phân loại rõ ràng.
- Trộn chất lỏngSử dụng chất lỏng ổn định để giữ mẫu an toàn.
- Số lượng mẫuGiữ dưới 5 mg / ml để tránh các vấn đề cột.
Hãy thử những thay đổi nhỏ và kiểm tra kết quả để tìm thiết lập tốt nhất.
Bảo trì đúng thiết bị để tăng tuổi thọ
Chăm sóc thường xuyên giúp các công cụ hoạt động lâu hơn:
- Làm sạch các cộtRửa sạch với chất lỏng sau mỗi lần sử dụng để loại bỏ bụi bẩn.
- Kiểm tra máy bơmTìm rò rỉ hoặc áp lực kỳ lạ.
- Cửa hàng đúngGiữ các cột trong chất lỏng phù hợp khi không được sử dụng.
Chăm sóc thường xuyên giữ hiệu suất ổn định và giảm nghỉ ngơi.
Những thách thức phổ biến trong nhiễm sắc loại trừ kích thước
SEC có thể có vấn đề, nhưng biết chúng sẽ giúp bạn sửa chữa chúng.
Các vấn đề về độ phân giải và hiệu quả tách
Sự sắp xếp xấu thường xuất phát từ:
- Nhầm cộtChọn một cột có kích thước lỗ phải.
- Dòng chảy nhanhChậm dòng chảy để sắp xếp tốt hơn.
- Mẫu dày: Mẫu dày mỏng để di chuyển dễ dàng hơn.
Kiểm tra kết quả để phát hiện và sửa chữa các vấn đề phân loại sớm.
Giải quyết vấn đề tải quá cột
Sự quá tải xảy ra khi quá nhiều mẫu được thêm vào. Các dấu hiệu là đỉnh cao rộng và phân loại kém. Để sửa chữa:
- Sử dụng ít mẫu hoặc một lượng nhỏ hơn.
- Sử dụng một cột lớn hơn để có thêm không gian.
- Thay vào đó, thực hiện một số chạy nhỏ.
Giải quyết các vấn đề tập hợp mẫu
Mẫu cụm lộn kết quả. Dừng lại bằng:
- Sửa lỏngThêm muối hoặc chất làm sạch để giữ cho các phân tử ổn định.
- Lọc mẫuLoại bỏ các cụm trước khi thêm.
- Kiểm soát nhiệtGiữ giữa 4-25 ° C để giảm cụm.
Các bước này đảm bảo sắp xếp sạch sẽ, chính xác.
PERSEE: Một nhà cung cấp đáng tin cậy cho các giải pháp nhiễm sắc
Tại PERSEE, chúng tôi là nhà sản xuất công cụ phòng thí nghiệm hàng đầu từ năm 1991. Trụ sở tại Bắc Kinh, chúng tôi tập trung vào việc tạo, cải thiện và bán thiết bị khoa học chất lượng cao. Chúng tôi có chứng nhận ISO9001, ISO14001, OHSAS18001 và CE. Chúng tôi dành riêng cho sự chính xác và các ý tưởng mới. Sự tiếp cận toàn cầu của chúng tôi giúp các nhà nghiên cứu ở khắp mọi nơi sử dụng kỹ năng của chúng tôi.
Tổng quan về chuyên môn của PERSEE trong công nghệ nhiễm sắc
Chúng tôi rất giỏi trong việc tạo ra các công cụ nhiễm sắc cho nhu cầu nghiên cứu. Các công cụ của chúng tôi giúp kiểm tra thiên nhiên, an toàn thực phẩm và công việc thuốc. Với thiết kế dễ sử dụng, chúng tôi làm cho các phương pháp cứng như SEC đơn giản và nhanh chóng.
Sản phẩm chính được cung cấp bởi PERSEE cho nhiễm sắc loại trừ kích thước
Chúng tôi cung cấp các công cụ mạnh mẽ cho SEC, bao gồm:
- Máy quang phổ khối lượng M7: Tăng cường phát hiện cho các mẫu khó khăn.
- Máy chụp sắc tố khí G5GCCung cấp kiểm soát chính xác cho quy trình làm việc của SEC.
- Sắc ký khí GC1100Tuyệt vời cho các nhiệm vụ SEC bận rộn.
Các công cụ này đáng tin cậy và mạnh mẽ cho phòng thí nghiệm của bạn. Kiểm tra toàn bộ phạm vi của chúng tôi để tìm đúng công cụ.
Kết luận: Làm cho các kỹ thuật phức tạp dễ tiếp cận hơn cho các nhà nghiên cứu
Kích thước loại trừ nhiễm sắc không cần phải đáng sợ. Học những điều cơ bản của nó và sử dụng các ý tưởng học tập thực tế. Cải thiện thói quen phòng thí nghiệm Sau đó, các nhà nghiên cứu có thể làm chủ SEC dễ dàng. Tại PERSEE, chúng tôi làm việc để làm cho các phương pháp khó khăn đơn giản với các công cụ mới và sự giúp đỡ của chuyên gia. Bạn muốn cải thiện các bài kiểm tra SEC của bạn? Liên hệ với chúng tôi cho các giải pháp phù hợp với bạn.
Câu hỏi thường gặp (FAQs)
Lợi thế chính của chromatography loại trừ kích thước là gì?
Lợi ích chính của nhiễm sắc học loại trừ kích thước là phân loại các phân tử theo kích thước mà không gây hại cho chúng. Điều này làm cho nó hoàn hảo cho việc làm sạch các phân tử tinh tế như protein và nghiên cứu chúng như chúng là.
Làm thế nào để chọn cột phù hợp cho thí nghiệm của tôi?
Chọn một cột dựa trên kích thước phân tử của mẫu của bạn. Phù hợp với kích thước lỗ của cột với các phân tử mục tiêu. Ví dụ, sử dụng lỗ 100-300 Å cho protein hoặc 500-1000 Å cho polymer. Kiểm tra hướng dẫn của nhà tạo cột cho việc sử dụng cụ thể.
Một số dấu hiệu phổ biến cho thấy cột của tôi cần thay thế là gì?
Các dấu hiệu phổ biến là phân loại kém, đỉnh cao rộng hoặc phía sau, phản áp cao và thời gian thoát không đồng đều. Những điều này cho thấy cột bị mòn hoặc bẩn, có nghĩa là nó cần được thay thế để giữ cho các xét nghiệm chính xác.
