アプリケーション

GCMによる食物中のピリダベン残留物の測定

9年14、2023

原理
ピリダベン残基は、ゲル透過クロマトグラフィー（GPC）またはSPEによって精製され、GC-ECDおよびGC-MSによる確認によって測定された、アセテートシクロヘキサンまたはアセトニトリルで抽出されました。

試薬と材料
使用されるすべての試薬は、特に指定がない限り、分析的に純粋でなければなりません。
1。酢酸エチル：HPLCグレード。
2。シクロヘキサン：HPLCグレード。
3。アセトニトリル：HPLCグレード
4。ヘキサン：HPLCグレード。
5。トリクロロメタン：HPLCグレード。
6。無水硫酸ナトリウム;
4時間、しっかりと閉じた容器に保管します。
7。塩化ナトリウム。
8。酢酸エチル +シクロヘキサン（1 + 1、V/V).
9。ヘキサン +トリクロロメタン（9 + 1、V/V).
10。シクロヘキサン +酢酸エチル（6 + 1、V/V)
11。ピリダベン標準（ピリダベン：CAS No. 96489-71-3：分子式C19H25CIN2OS;分子量：364。93;純粋：99％）。
12。標準的なストックソリューション：一定量のピリダベン標準の重量を正確に比較検討し、少量の酢酸エチルで解きます。
13.標準作業ソリューション：次に、標準作業溶液として、酢酸エチルで標準ストック溶液を必要な濃度に希釈します。
14。カーボン-PSA-チューブ：1ml、50mg、3MLアセトニトリル +酢酸エチル（10）
15。HLBSPEチューブ：3 mL、60 mg、または同等。
（9）、開始前に2 mLのトリクロロメタンと5 mLの蒸留水を。
16。フィルム：0.45μm。

装置と機器
1。ガスクロマトグラフィー：ECDを装備
2。ガスクロマトグラフィー：電子イオン化質量分析を装備。
3。分析バランス：0.01 gの感覚。
4。分析バランス：0.1 mgの感覚
5。ISOCRATICポンプと分数コレクターを装備したゲル透過クロマトグラフ。
6.遠心分離機：4000r/min。
7。回転真空蒸発器
8。無水硫酸ナトリウムカラム：7.5 cm x 1.5 cm（i。d。）5 cmの吸収性綿の燃料充填硫酸ナトリウムを満たしました。
9。Vortexミキサー。
10。超音波マシン。
11。ホモジナイザー。
12。50ml停止プラスチック遠心分離機チューブ。

テストサンプルの準備と保存
テストサンプルの準備
1。シリアルと茶
サンプルをCAに四分の一に。
2。果物と野菜
結合された一次サンプルはCAに縮小されます。

3。肉と肉製品、ナッツ
代表者を約1 kgのサンプルにします。

テストサンプルの保存
シリアル、茶、ナッツ、酢、蜂蜜、蜂蜜の製品のテストサンプルは、0〜4°の間に保管する必要があります。

手順
抽出
1。野菜、果物。
試験サンプル10g（精度0.01g）を50mLのストッパー付きプラスチック製遠心管に入れ、酢酸エチル+シクロヘキサン20mLを加えて1000/分で1分間ホモジナイズ抽出した後、4000/分で3分間遠心分離し、上澄み液を別の清潔な管に移し、酢酸エチル+シクロヘキサン20mLで再度抽出操作を繰り返します。上澄み液を無水硫酸ナトリウムのカラムに通して水を除去し、流出液を150mL濃縮瓶に集め、40℃のウォーターバスを備えたロータリーエバポレーターでほぼ乾燥するまで濃縮します。残留物を酢酸エチル+シクロヘキサン10.0mLで溶解し、0.45μmのメンブランフィルターで濾過して精製を待ちます。

2。クルミ。
テストサンプルの重量10（0.01 gに正確）50 mLの停止プラスチック遠心性チューブに。

3。茶と玉ねぎ
重量2。5g（0.01 gの精度）のサンプル、50 mLの停止プラスチック遠心分離機チューブに、15 mlの蒸留水を加え、1時間耐えます。
上清を無水硫酸ナトリウムの柱に通し、水を除去し、排水を150 mLの濃縮ボトルに集め、40°の水浴を備えた回転蒸発器によってほぼ乾燥するように凝縮します。

クリーンアップ
野菜の果物、穀物、クルミ、鶏の肝臓のためのGPCクリーンアップ。
1。GPC動作条件
a）GPCカラム：300 mm 10 mm（i。d。）、バイオビーズS-x3または同等物：
b）移動相：酢酸シクロヘキサン - エチル（1+1）：
c）流量：4。7ml/min:
d）サンプルループでの注入量：5 ml：
e）溶出物を収集する時間：7.5分〜12。

2。GPCクリーンアップステップ

最初のステップに示されているパラメーターを使用して、前に取得したソリューションをGPCの列に転送します。
溶出はきれいなチューブに収集され、窒素の流れの下で35℃で乾燥して蒸発し、測定と立体化のために1.0 mLの酢酸エチルで再溶解します。

3.酢と蜂蜜のためのSPEクリーニングアップ
重量2.5 gのサンプルをプラスチック遠心分離機に入れ、5 mLの蒸留水と渦を30秒間加えます。

4。お茶とタマネギの掃除
前に獲得した溶液を炭素PSAチューブに移し、1.5 mLのシクロヘキサン +酢酸エチルですすぎます。

GC決定
GC操作条件
a）列：DB-1301 30 M0。25mm（I.D.）x0。25UMまたは同等。
b）カラム温度：50℃（20°/min） - 200℃（5°/min） - 260℃（10分）。
c）注入ポート温度：260 C：
d）ECD温度：300 C：
e）キャリアガス：窒素（純度> 99.999％流量：2 ml {{url_placeholder_0}}）;
f）噴射モード：スプリットレス。
G）注入量：1 UL。

GC決定
サンプル溶液中のピリダベン残基のおおよその濃度によれば、サンプル溶液のピーク面積と同様のピーク面積を持つ標準作業溶液を選択します。
上記のGC条件下では、ピリダベンの保持時間は約20。9分です。

GC-MSの確認
GC-MS操作条件
a）クロマトグラフィーカラム：30 m x0。25mm（i。d。）
0。25umフィルムの厚さ、およびHP-5msシリカ毛細血管柱または同等のもの。
b）列温度：50℃（1分保留）（10℃/min） - 280℃（10分）;
c）注入ポート温度：250 ℃；
d）インターフェイス温度：280℃;
e）電子イオン化モード：EL;
f）ライオン化エネルギー：70 eV：
g）キャリアガス：ヘリウム、純度>99。999％、流量1.0mL/min:
h）噴射モード：分割されて、0後にバルブを開きます。
75分：
i）注入量：1 UL：
j）決定モード：SIM：
k）選択された監視イオン (m/z): 147、309、105：
l）溶媒保護遅延：5.0分

GC-MSの確認
上記の動作条件に応じて、サンプルソリューションと標準作業ソリューションの両方で同じ保持時間にピークが表示される場合、標準ソリューションとサンプルソリューションを分析します。

空白のテスト
ブランクテストは、上記の手順に従ってサンプルの追加なしで実施されます。

決定の制限
桃、梨、アスパラガス、ジャガイモ、トウモロコシ、そば、蜂蜜、酢、クルミ、ルビット肉、鶏肉、エビ、茶葉、タマネギ、鶏レバーの測定限界は0.01mg/kgです。

回復
この方法の確認制限と回復：