Metodo di analisi dello spettrofotometro UV-Vis

Obiettivi sperimenta
1. Impara il principio e il funzionamento del metodo di analisi dello spettrofotometro UV-Vis Principio e funzionamento, impara la struttura dello spettrofotometro UV-Vis.
2. Impara il metodo di analisi del conservante alimentare mediante spettrofotometro UV-Vis.
3. Impara il metodo del processo di dati per computer, impara a quantificare il conservante negli alimenti.

Principio
1. Analisi qualitativa: la diversa lunghezza d'onda ha una diversa assorbanza per il campione, secondo il picco di assorbanza, la valle di assorbanza, il picco della spalla e l'assorbanza del campione per fare analisi qualitative.
2. Analisi quantitativa: l'assorbanza del composto a specifica lunghezza d'onda aumenta di proporzione diretta alla concentrazione e alla distanza ottica attraverso il campione

Legge di Lambert-Beer:

3. Principio quattiveanalisi dello spettrofotometro UV-Vis.

4. Condizioni di prova

Absorbance range: 0.2-0.7Abs

Soluzione di riferimento:
Campione vuoto: solvente senza campione
Cella di riferimento: materiale e tipo cuvetta della cella di campionamento, abbinata

Struttura dello spettrofotometro UV-Vis
Un sistema UV-Vis è costituito da sorgente luminosa, monocromatore, supporto campione, rivelatore e sistema di segnale.

Fig.1 UV-Vis a doppio raggio

Fonte luminosa: lampada di tungsteno emette luce 320-2500nm, lampada deuterio emette la luce 185 ~ 400 nm
Monocromatore: luce mista divisa in luce monocromatica, come mostrato in Fig.1.
Rilevatore: ricevere la luce e convertire in segnale elettrico.
Secondo il percorso ottico del sistema UV-Vis, la UV-Vis si divide in tre diversi tipi: raggio doppio (Fig. 1), trave singolo (Fig.2) e raggio diviso (Fig.3).

Fig.2 trave singolo Fig.3 raggio diviso

Trave singolo, un singolo raggio è un sistema ottico più semplice di UV-Vis, l'intera luce del monocromatore attraverso il campione a rivelatore.
Trave diviso, la luce del monocromatore è divisa in due parti, un raggio è attraverso il campione per rivelatore, un altro raggio arriva direttamente sul rivelatore, questo raggio è un raggio di riferimento.
Doppio raggio, la luce del monocromatore è divisa in due parti, un raggio è attraverso il campione per rivelatore, un altro raggio è attraverso il campione di riferimento da rivelatore.

Esperimento - Analisi del contenuto di conservante alimentare in sprite

L'acido benzoico e l'acido sorbico sono due tipi comuni di conservanti alimentari.

Analisi qualitativa del conservante

Prendi l'estratto di etere purificato e diluito (o una soluzione acquosa diluita sprite), usa
Una cuvetta di assorbimento di 1 cm, con dietil etere (o acqua distillata) come riferimento, spettro di assorbimento UV a lunghezza d'onda di 210 ~ 310 nm, secondo il picco di assorbimento, l'intensità di assorbimento e gli spettri di assorbimento di acido benzoico e campioni di acido sorbico sono stati confrontati per determinare il tipo di preservativo nel campione.

Curva di calibrazione standard
Preparare la soluzione standard di acido benzoico (o acido sorbico) pesare accuratamente il campione standard da 10 g, dissolversi con etere (o acqua), trasferire su un pallone volumetrico da 25 ml e diluire al volume.

Soluzioni standard pipette 0,50 ml, 1,00 ml, 1,50 mL, 2,00 ml e 2,50 ml in cinque boccette volumetriche da 10 ml e diluiti al volume con etere (o acqua).

Spettrofotometro UV-Vis e procedure di funzionamento UVWin
1. Accendi su computer e spettrofotometro UV-Vis.
2. Avvia il software UVWin all'inizializzazione.
3. Pre-riservato lo strumento 20 minuti.
4. Dopo l'inizializzazione, inserire l'interfaccia operativa, come mostrato l'immagine seguente, il software include cinque funzioni principali: misurazione fotometrica, scansione dello spettro, analisi quantitativa, scansione cinetica e scansione SBW.

Scansione dello spettro

Analisi quantitativa

5. Test di campioni standard per creare curva di calibrazione e calcolare la concentrazione di campioni sconosciuta.
6. Dopo il test, i dati di output o il rapporto di test di stampa, quindi spegnere lo strumento e il computer.

Prodotti UV-Vis da Persee

 

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