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Détermination des résidus de chlorpyrifos dans les aliments par GCM

14 septembre 2023

1 portée
Cette norme spécifie la méthode de test des résidus de chlorpyrifos dans les aliments par chromatographie en phase gazeuse - détecteur photométrique à flamme (GC -FPD) et spectrométrie de masse en phase gazeuse (GC -M).
Cette norme est applicable à la détermination et à la confirmation de la teneur en résidus des chlorpyrifos dans le maïs, la croix brune, l'oignon d'électricité, les épinards, le piment, l'orange, la pomme, le noyau de pin-nut, le thé, le miel, le poisson, le miel, le porc, le rein de poulet et le foie de poulet.

2 principe

L'orange ou un autre échantillon végétal est extrait avec de l'acétate d'éthyle.

3 réactifs et matériaux

Tous les réactifs utilisés doivent être analytiquement purs, sauf indication contraire.
3.1 Acétone: grade de résidus.

3.2 Dichlorométhane: grade de résidus.

3.3 Cyclohexane: grade de résidus
3.4 Acétate d'éthyle: grade de résidus.

3,5 N-hexane: grade de résidu.

3.6 Solution aqueuse de chlorure de sodium.

3.7 Anhydrous sodium sulfate: ignited at 650 °C for 4h, and then stored in tightly sealed container.
3,8 Solution aqueuse de chlorure de sodium (5%): peser le chlorure de sodium 5,0 g.
3.9 Acétate d'éthyle-n-hexane (1+1 V/V) volume 100 mL Acétate d'éthyle dans un erlenmeyer de 250 mL, puis ajouter 100 mL de n-hexane, mélanger.
3.10 L'acétate d'éthyle-cyclohexane (1 + 1V/V): volume100 ml d'acétate d'éthyle en 250 ml de file d'erlenmeyer, puis ajoutez 100 ml de cyclohexane, mélangez-les.
3.11 Chlorpyrifos Standard (C9 H11C13 NO3 PS, CAS n ° 2921-88-2) Pureté> 98%.

3.12 Solution mère standard: Pesez avec précision une certaine quantité de norme de chlorpyrifos et de le résoudre avec un petit volume d'acétate d'éthyle.
3. 13 Solution de travail standard: diluer la solution mère standard avec de l'acétate d'éthyle à la concentration requise pour faire la solution de travail standard.
3.14 Florisil SPE Tube: florisil, 500 mg, 6 ml ou équivalent.

3. 15 Tube SPE en carbone actif: Envi -Carb.250 mg, 6 ml ou équivalent.
3.16 Filtre à membrane: 0. 45 Um.

3. 17 Carbone graphitique: 60 mesh ~ 80 mesh

4 appareils et équipements

4. 1 GC: Chromatographie en phase gazeuse équipée de FPD, 526 nm.
4.2 GC-MS: équipé d'une source d'électro-impact (EL).

4. 3 Centrifugeuse : 4 000 tr/min.

4.4 GPC: équipé d'une pompe isocratique et d'un collecteur de fraction.

4. 5 homogénéisateur.

4. 6 Évaporateur à vide rotatif.

4. 7 FLASK ERLENMEYER BOUCHED: 250 ml

4.8 Entonnoir de séparation: 250 ml

4.9 Bouteille de concentré: 50 ml et 250 ml

4. 10 Balance électronique: précis à 0. 000 1 g.

4. 11 tube à centrifugeuse en plastique: 50 ml

5 Préparation et stockage de l'échantillon de test
5.1 Préparation de l'échantillon de test

5.1.1 maïs, riz brun, thé, noyau de pin, arachide et miel

Prenez environ 500 g d'échantillon représentatif.

5.1.2 Orange, pomme, épinards et oignons verts

Prenez environ 500 g d'échantillon représentatif.
5.1.3 porc.

Prenez environ 1 kg d'échantillon représentatif.
5.1.4 Chili

Prenez environ 500 g d'échantillon représentatif.
5.2 Stockage de l'échantillon de test

The test samples of cereals, nuts, tea. honey and chili should be stored between 0°C~ 4° C. Other samples should be frozen and stored below -18 ° C. While sampling and preparing sample, please avoid contamination or any factors that may change residue content.
6 procédure

6.1 Extraction

6.1.1 Orange, pomme, épinards, oignons verts, maïs, brun-sécheur et chili

Weigh 10g (accurate to 0.01g) of the test sample into a 50 mL centrifuge tube (4. 11). Add 6 g of anhydrous sodium sulfate and 30 mL ethyl acetate. Homogenize for 2 min. Centrifuge for 5 min at 5000 r/min. Filter the supernatant into a 250 mL concentrate bottle. Extract the residue with 30 mL of Ethyl acetate once more and filter the second supernatant. Combine the filtrates. Condensed to nearly dry by rotary evaporator in 40 °C water bath. Add 2 mL of ethyl acetate-n-Hexane (1+1) to dissolve the residue and then wait for cleaning -up.

6.1.2 Thé

Weigh 5g (accurate to 0.01 g) of the test sample into a 50 mL plastic centrifuge tube. Add 10 mL water and 30 mL ethyl acetate. Homogenize for 2 min. Centrifuge for 5 min at 5,000 r/min. Filter the supernatant into a 250 mL concentrate bottle. Extract the residue with 30 mL of Ethyl acetate once more and filter the second supernatant Combine the filtrates. Condensed to nearly dry by a rotary evaporator in 40 °C water bath. Add 2 mL of ethyl acetate-n-Hexane (1+1) to dissolve the residue and then wait for cleaning -up.
6.1.3 porc, foie de poulet, rein de poulet, poisson, noyau de pin -net et arachide

Weigh 20 g (accurate to 0.01g) (5g for pine -net kernel and peanut) of test sample into a 250 mL stoppered Erlenmeyer flask. Add 20 mL water and 100 mL acetone. and homogenize for 3 min. Filter the supernatant into a 250 mL concentrate bottle. Extract the residue with 50 mL of acetone once more and filter the second supernatant. Combine the filtrates. Condensed to about 20 mL by a rotary evaporator in 40 °C water bath.
Transfer the extract into one 250 mL separatory funnel. Add 100 mL sodium chloride aqueous solution and 100 mL dichloromethane. Shake 3 min. Stand still waiting for layering. Collect dichloromethane phase. Extract aqueous phase twice with 2 x 50 mL dichloromethane. Combine dichloromethane phases. Dehydrate with an anhydrous sodium sulfate tube, Collect eluates into one 250 mL concentrate bottle. Condensed to nearly dry by a rotary evaporator in 40 °C water bath. Add 10 mL of ethyl acetate -n-Hexane (1+1) to dissolve the residue, filter the solution with 0. 45 μ m membrane and then wait for cleaning -up.
6.2 Nettoyage -Up

6. 2. 1 GPC Cleaning -Up

6.2.

a) Colonne GPC: 700 mm x 25 mm (i. D.) Bio Beads S-X3 ou équivalent;

b) Phase mobile: acétate de cyclohexane (1 + 1)

c) Taux de débit: 4. 7 mL/min:

d) Volume d'injection à la boucle d'échantillon: 10 ml:
e) Temps de pré-rinçage: 10 min:

f) Temps d'équilibre GPC: 5 min:

g) Time of collecting the eluates: 22 min~31 min. 6.2.1.2 GPC cleaning-up procedure Purify 10 mL of the solution which is waiting for cleaning -up (6. 1. 3) according to the condition described in the section 6. 2. 1. 1. Condense the collected constituents to nearly dry at 40 °C. Dissolve the residue with 3 mL of ethyl acetate -n-hexane (1+1) and wait for next SPE cleaning -up(pine-nut kernel and walnut kernel should repeat GPC cleaning -up step described in the section 6.2.1.1) 6.2.2 SPE Cleaning -up Couple the active carbon SPE tube and florisil SPE tube up to down (for samples containing much colorants, such as spinach, tea etc, add 1.5 cm high graphic carbon SPE tube (3. 16) in the active carbon tube), Rinse the coupling columns with 6 mL of n -hexane-ethyl acetate (1+1) in advance. Discard the washings. Transfer 2 mL of the sample solution from 6. 1. 1, 6. 1. 2 and 6. 1. 3 into the upper column, Elute with 3 mL of n-hexane-ethyl acetate (1+1). Collect eluates into a concentrate bottle. Evaporate to nearly dry in water bath. Dissolve the residue and dilute exactly to 1.0 mL with ethyl acetate for determination by GC or confirmation by the GC-MS. 6.3 Determination 6.3.1 GC conditions
a) Colonne chromatographique: colonne capillaire de silice HP -5, 30 m x 0. 25 mm (i. D

b) Column temperature: 50 °C (hold 1 min) (30°C/min) – 180 °C (hold 1 min) (10° C/min) – 250°C (hold 10min).
c) Température du port d'injection: 250 C:

d) Température de l'interface: 250 C:

e) Gas porteur: azote, pureté> 99,999%, débit de 1,0mL/min:

f) Injection volume: 1 μL;

g) Mode d'injection: Splitless.

6.3.2 Conditions de fonctionnement GC -M

a) Colonne chromatographique: colonne capillaire de silice HP -5.

b) Column temperature: 50 °C (hold 2 min) (20°C/min) – 200 °C (hold 1 min) (5° C/min) – 270°C (hold 18min).
c) Injection port temperature: 280°C

d) Interface temperature: 280 °C:

e) Gas porteur: hélium.

f) Volume d'injection: 1 ul

g) Mode d'injection: Splitless.

h) Mode d'ionisation électronique: El:

i) Énergie d'ionisation: 70 eV:

J) Mode de détermination: SIM;

k) Ions de surveillance sélectionnés (m/z) ; l'ion de quantification est 197 et les ions de confirmation sont 258, 286, 314 :
l) Délai de solvant 9. 0 min.
6.3.3 Détermination GC

Selon le contenu approximatif des chlorpyrifos, sélectionnez une solution de travail standard qui a une concentration similaire de la solution d'échantillon.

7 Limite de détection et récupération

7.1 Limite de détermination et de confirmation

La détection et la limite de confirmation de la méthode sont indiquées dans le tableau.
7.2 Gamme de fortification et de récupération

La plage de fortification et la récupération de cette méthode est indiquée dans le tableau.