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Méthode pour la détermination du nombre de diastase dans le miel par le spectrophotomètre UV-Vis

Principe
Après avoir mis une solution d'amidon dans une solution d'échantillon de miel, un peu d'amidon est l'hydrolyse par diastase dans le miel.

Réactifs et matériaux
Sauf ceux qui ont une notification spécifique, des réactifs de diplôme AR sont utilisés;

Réactif:
1. Iode.
2. Iodure de potassium.
3. Acétate de sodium (CH3coona · 3H2O).
4. acétate glacé
5. Chlorure de sodium.
6. Admidon soluble.
7. Solution mère d'iode: Pesez 8,8 g d'iode et 22 g d'iodure de potassium, mélangeant avec 30 ml ~ 40 ml d'eau, dilué à 1000 ml.
8. Solution d'iode: peser 20 g d'iode de potassium, ajouter 5 ml de solution mère d'iode, diluer à 500 ml par l'eau (cette solution ne peut être utilisée que pendant 2 jours).
9. Solution de tampon acétate: pH 5.3 (1,59 mol {{url_placeholder_0}}).
10. Solution de chlorure de sodium (0,5 mol {{URL_PlaceHolder_0}}): peser 14,5 g de NaCl, dissoudre dans 500 ml d'eau.
11. Solution de l'amidon: dissoudre l'amidon soluble 2G dans 90 ml d'eau.

Équipement:
1. Spectrophotomètre UV-VIS.
2. Porte-cellule à température constante

Préparation des échantillons et réserve
Préparation des échantillons:
Remuer bien l'échantillon, puis transférer 0,5 kg dans une bouteille d'échantillon comme échantillon de test.
Remarque: Le cristal apparaît ou non, tout l'échantillon ne peut pas être chauffé.

Exemple de réserve:
L'échantillon peut être conservé à température ambiante.

Procédure d'expérience
Test standard de la solution d'amidon
Mesurer 5,0 ml de solution d'amidon (réactif 11) et 10,0 ml d'eau, placer dans 40 ℃ bain d'eau séparément pendant 15 minutes.

Exemples de tests:
1. Conditions de spectrophotomètre:
a) Longueur d'onde: 660 nm
b) Référence: eau
2.
3. Mesurez une solution d'amidon de 5 ml, une solution d'échantillon de 10 ml (test d'échantillon 2) et une solution d'iode 10 ml, placer dans 40 ℃ bain d'eau séparément pendant 15 minutes.
4. Après 5 minutes, transférez une solution mixte de 1,0 ml dans une solution d'iode chauffée de 10 ml et diluez avec la quantité enregistrée d'eau (enregistrée dans le test standard de la solution d'amidon) et mélangez à nouveau bien.
5. Si l'absorbance est supérieure à 0,235, la 4ème étape doit être répétée jusqu'à ce que l'absorbance soit inférieure à 0,235.
6. Pendant la mesure, la solution mixte, la solution d'iode et l'eau doivent être maintenues à 40 ℃ Bath-eau.

Calcul
Sur un papier de coordonnées logarithmiques, le nom de l'axe y comme absorbance (%) et axe x comme temps (min).

Lorsque x est le nombre de diastase en solution (ml / (g · h)), t est le temps correspondant (min).

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