1. Vista geral do método
Após a amostra ser digerida pelo aquecimento com ácido, o selenio hexavalente na amostra é reduzido para selenio tetravalente em um meio de ácido clorírico de 6 mol/L. O borohidrato de potássio é usado como agente redutor para reduzir o selenio tetravalente para selenido de hidrogênio no meio de ácido clorírico. O selenido de hidrogênio é transportado no atomizador pelo gás transportador (argão) para atomização. Sob a irradiação de uma lâmpada de catódio de selenio vazio, os átomos de selenio de estado terrestre estão entusiasmados com um estado de alta energia. Quando desactivados e retornados ao estado do solo, eles emitem fluorescência com um comprimento de onda característico. A intensidade de fluorescência é proporcional ao conteúdo de selenio, e a quantificação é realizada em comparação com a série padrão.
2. Instrumentos e Reagentes
2.1 Instrumentos e equipamento
2.1.1 Instrumentos de ensaio
| Serie No. | Nome | Quantidade | Requisitos Técnicos | Acessórios |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Spectrophotômetro de Fluorescência Atômica | 1 conjunto | – | Lampa de Catódio Hollow de Selenio |
| 2 | Argon Gas | 1 cilindro | Pureza ≥ 99,999% | – |
2.1.2 Equipamento de pré-tratamento de amostras
| Serie No. | Nome | Quantidade | Requisitos Técnicos | Acessórios |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Balanço electrónico | 1 conjunto | Sensibilidade: 1 mg | – |
| 2 | Sistema de Digestião de Microondas | 1 conjunto | – | Tanque interior de digestão de politetrafluoroetileno (PTFE), dispositivo de condução ácido de digestão |
| 3 | Plata quente ajustada | 1 conjunto | – | – |
| 4 | Micropipeta | 1 cada (100 μL ~ 1000 μL, 1000 μL ~ 5000 μL) | – | – |
| 5 | Tubo Colorimétrico | Vários (10 ml) | – | – |
2.2 Reagentes
2.2.1 Reagentes mentais
| Serie No. | Nome | Requisitos Técnicos | Observações |
|---|---|---|---|
| 1 | Ácido nítrico | Reagente garantido (GR) | – |
| 2 | Peróxido de hidrogênio | Reagente garantido (GR) | – |
| 3 | Ácido hidroclórico | Reagente garantido (GR) | – |
| 4 | Hidróxido de potássio | Reagente Analítico (AR) | – |
| 5 | Borohidrato de potássio | Reagente Analítico (AR) | – |
2.2.2 Reagentes preparados
| Serie No. | Nome | Método de Preparação | Observações |
|---|---|---|---|
| 1 | Solução de ácido hidroclórico (6 mol/L) | Medir 50 ml de ácido clorírico, adicionar lentamente a 40 ml de água, refrigerar, depois diluir para 100 ml com água e misturar bem. | – |
| 2 | Solução de Hidróxido de Potássio (5 g/L) | Pese 5 g de hidróxido de potássio, dissolva-o em 1000 ml de água e mistura bem. | – |
| 3 | Borohidrato de potássio Solução Alcálica (15 g/L) | Pese 15 g de borohidrato de potássio, dissolva-o em solução de hidróxido de potássio (5 g/L), e mistura bem. | Prepare-se fresco antes do uso |
| 4 | Ácido hidroclórico (10 90) | Medir 50 ml de ácido clorírico, adicionar lentamente a 450 ml de água e misturar bem. |
3. Procedimento de Operação
3.1 Preparação de amostras
3.1.1 Preparação da Solução de Testes
Cruzar e homogenizar a amostra, e armazená-la num saco de amostra limpo.
Peso 0,2 g 0,3 g da amostra (preciso a 0,001 g), coloca-a num tubo de digest ão, adiciona 8 ml de ácido nítrico e 1 ml de peróxido de hidrogênio, agita e mistura bem, depois digere num instrumento de digestão de microondas. As condições recomendadas de digestão de microondas são mostradas na tabela abaixo (condições de digestão podem ser definidas independentemente de acordo com diferentes instrumentos). Após digestão, refrigerar o tubo de digestão, depois colocá-lo no dispositivo de condução ácido de digestão e calor contínuamente a 140 °C at é que o volume seja de cerca de 1 ml (não evaporar para secar). remover o tubo, adicionar 5 ml de solução de ácido clorídrico (6 mol/L), continuar aquecindo até que a solução se torne clara e incolorada com fumos brancos, então remover e refrigerar. Transferir a solução para um flask volumétrico de 10 ml com água deionizada, diluir para o volume marcado com água, misturar bem e colocar de lado para testes. Conduzir um teste em branco de reagente simultaneamente.
Peso 0,2 g 0,3 g da amostra (preciso a 0,001 g), coloca-a num tubo de digest ão, adiciona 8 ml de ácido nítrico e 1 ml de peróxido de hidrogênio, agita e mistura bem, depois digere num instrumento de digestão de microondas. As condições recomendadas de digestão de microondas são mostradas na tabela abaixo (condições de digestão podem ser definidas independentemente de acordo com diferentes instrumentos). Após digestão, refrigerar o tubo de digestão, depois colocá-lo no dispositivo de condução ácido de digestão e calor contínuamente a 140 °C at é que o volume seja de cerca de 1 ml (não evaporar para secar). remover o tubo, adicionar 5 ml de solução de ácido clorídrico (6 mol/L), continuar aquecindo até que a solução se torne clara e incolorada com fumos brancos, então remover e refrigerar. Transferir a solução para um flask volumétrico de 10 ml com água deionizada, diluir para o volume marcado com água, misturar bem e colocar de lado para testes. Conduzir um teste em branco de reagente simultaneamente.
Programa de Aumentação da Temperatura de Digestião de Microondas
| Passo | Temperatura / °C | Tempo de segurança / min |
|---|---|---|
| 1 | 80 | 3 |
| 2 | 120 | 5 |
| 3 | 140 | 5 |
| 4 | 160 | 5 |
| 5 | 180 | 30 |
3.1.2 Preparação de soluções padrão
-
Preparação da Solução Intermediada Standard de Selenio (1 μg/ml):
Precisamente pipetar 100 μL de solução padrão de selenio (1000 μg/mL) em um flask volumétrico de 100 ml, adicionar 20 ml de ácido clorírico, diluir para o volume marcado com água e misturar bem. -
Preparação da Solução de Trabalho Standard de Selenio (10 ng/ml):
Precisamente pipetar 1,0 mL de solução intermediária padrão de selenio (1 μg/mL) em um flask volumétrico de 100 mL, adicionar 20 mL de ácido clorírico, diluir para o volume marcado com água e misturar bem para testar. -
Preparação da série padrão de selenio:
O instrumento se dilui automaticamente para preparar uma série padrão com concentrações de 0,00 ng/mL, 1,00 ng/mL, 2,00 ng/mL, 4,00 ng/mL, 8,00 ng/mL e 10,00 ng/mL.
3.2 Ensaios de amostras
- Condições de Teste
Condições de referência para o espectrofotométro de fluorescência atômica
| Alta Voltação Negativa (V) | 280 |
|---|---|
| Corrente de lâmpada (mA) | 50/50 |
| Temperatura de Atomização (°C) | 200 |
| Taxa de fluxo de gás de transporte (ml/min) | 300 |
| Taxa de fluxo de gás de protecção (ml/min) | 600 |
| Método de medição | Método padrão de curva |
| Modo de leitura | Área do Peak |
| Tempo de atraso (s) | 4.0 |
| Hora de leitura (s) | 18 |
| Volume de injeção de amostra (ml) | 1.0 |
- Teste de amostra
Ajusta o instrumento ao estado ótimo. Usar ácido clorírico (10 90) como fluxo de transporte e solução alcalina de borohidrato de potássio (15 g/L) como agente redutor. Após o valor de discriminação em branco do fluxo transportador ser inferior a 10,0, injeta a solução de trabalho padrão de selenio para determinar sua intensidade de fluorescência. Plote a curva padrão com concentração de massa como a abscissa e a intensidade de fluorescência como a ordenada.
Nas mesmas condições experimentais que aquelas para determinar a solução de série padrão, introduzir a solução em branco e a solução amostral no instrumento respectivamente, determinar suas intensidades de fluorescência e realizar quantificação em comparação com a série padrão.
