Prinsip
Setelah memasukkan larutan pati ke dalam larutan sampel madu, beberapa pati adalah hidrolisis oleh diastase pada madu.
Reagen dan materi
Kecuali mereka dengan pemberitahuan spesifik, reagen gelar AR digunakan;
Reagen:
1. Yodium.
2. Kalium iodida.
3. Sodium asetat (CH3Coona · 3H2O).
4. Iced Acetate Acid
5. Sodium klorida.
6. Pati larut.
7. Larutan stok yodium: Berat 8,8g iodin dan 22g kalium iodida, dicampur dengan air 30ml ~ 40ml, encerkan hingga 1000ml.
8. Larutan yodium: Berat 20g kalium yodium, tambahkan larutan stok yodium 5ml, encerkan hingga 500ml dengan air (larutan ini hanya dapat digunakan selama 2 hari).
9. Solusi buffer asetat: pH 5.3 (1.59 mol {{url_placeholder_0}}).
10. Larutan natrium klorida (0,5 mol {{url_placeholder_0}}): Berat 14,5g NaCl, larut dalam 500ml air.
11. Solusi Pati: Larutkan pati larut 2G dalam air 90ml.
Peralatan:
1. Spektrofotometer UV-Vis.
2. Pemegang sel suhu konstan
Sampel persiapan dan pelestarian
Persiapan Sampel:
Aduk sampel dengan baik, lalu transfer 0,5kg ke dalam botol sampel sebagai sampel pengujian.
Catatan: Apakah kristal muncul atau tidak, semua sampel tidak dapat dipanaskan.
Sampel Cagar Alam:
Sampel dapat diawetkan di bawah suhu kamar.
Prosedur Eksperimen
Tes Standar Solusi Pati
Ukur 5,0 mL larutan pati (reagen 11) dan 10,0 ml air, tempatkan dalam 40 ℃ penangas air secara terpisah selama 15 menit.
Pengujian Sampel:
1. Kondisi spektrofotometer:
a) Panjang gelombang: 660nm
b) Referensi: Air
2. Sampel pretreatment: Ukur 5G (± 0,01g) sampel disiapkan dan transfer ke gelas 20ml.
3. Ukur larutan pati 5ml, larutan sampel 10ml (pengujian sampel 2), dan larutan iodin 10ml, tempatkan dalam 40 ℃ penangas air secara terpisah selama 15 menit.
4. Setelah 5 menit, transfer 1.0ml larutan campuran ke dalam larutan yodium 10ml yang dipanaskan, dan encerkan dengan jumlah air yang direkam (direkam dalam uji standar langkah larutan pati) dan aduk lagi.
5. Jika absorbansi lebih besar dari 0,235, langkah ke -4 perlu diulang sampai absorbansi kurang dari 0,235.
6. Selama pengukuran, larutan campuran, larutan yodium dan air perlu dipertahankan pada 40 ℃ penangas air.
Perhitungan
Pada kertas koordinat logaritmik, nama sumbu y sebagai absorbansi (%), dan sumbu x sebagai waktu (min).
Di mana x adalah angka diastase dalam larutan (ml/(g · h)), t adalah waktu yang sesuai (min).
Hasil
Dengan menggunakan metode ini, pengulangan dan reproduktifitas percobaan adalah ≥95%.