1. Yöntem Genel Bakış
Numune asit ile ısıtılarak sindirildikten sonra, numunedeki altı değerli selenyum 6 mol / L hidroklorik asit ortamında tetravalent selenyuma indirilir. Potasyum borohidrit, hidroklorik asit ortamında tetravalent selenyumu hidrojen seleniğe indirmek için bir azaltıcı ajan olarak kullanılır. Hidrojen selenür atomizasyon için taşıyıcı gaz (argon) tarafından atomizasyona taşınır. Selenyum boş katot lambasının ışınlanması altında, temel durumdaki selenyum atomları yüksek enerji durumuna uyarılır. Deaktive edildiğinde ve temel duruma geri döndüğünde, karakteristik bir dalga uzunluğu ile floresan yayarlarlar. Floresans yoğunluğu selenyum içeriğine orantılıdır ve standart serilerle karşılaştırıldığında miqdarlık yapılır.
2. Aletler ve Reagentler
2.1 Aletler ve Ekipmanlar
2.1.1 Test Aletleri
| Seri numarası. | İsim | Miktar | Teknik Gereksinimler | Aksesuarlar |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Atom Floresans Spektrofotometri | 1 set | – | Selenyum Boş Katod Lambası |
| 2 | Argon Gazı | 1 silindir | Saflık ≥% 99,999 | – |
2.1.2 Örnek Ön Tedavi Ekipmanları
| Seri numarası. | İsim | Miktar | Teknik Gereksinimler | Aksesuarlar |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Elektronik Denge | 1 set | Hassasiyet: 1 mg | – |
| 2 | Mikrodalga Sindirim Sistemi | 1 set | – | Politetrafluoroetilen (PTFE) sindirim iç tankı, sindirim asit sürücü cihaz |
| 3 | Ayarlanabilir Sıcak Plaka | 1 set | – | – |
| 4 | Mikropipet | Her biri 1 (100 μL ~ 1000 μL, 1000 μL ~ 5000 μL) | – | – |
| 5 | Kolorimetrik Tüp | Birkaç (10 mL) | – | – |
2.2 Reagentler
2.2.1 Ham Reagentler
| Seri numarası. | İsim | Teknik Gereksinimler | Notlar |
|---|---|---|---|
| 1 | Nitrik Asit | Garantili Reagent (GR) | – |
| 2 | Hidrojen Peroksit | Garantili Reagent (GR) | – |
| 3 | Hidroklorik Asit | Garantili Reagent (GR) | – |
| 4 | Potasyum Hidroksit | Analitik Reagent (AR) | – |
| 5 | Potasyum Borohidrür | Analitik Reagent (AR) | – |
2.2 Hazırlanan Reagentler
| Seri numarası. | İsim | Hazırlama Yöntemi | Notlar |
|---|---|---|---|
| 1 | Hidroklorik Asit Çözümü (6 mol / L) | 50 mL hidroklorik asit ölçün, yavaş yavaş 40 mL suya ekleyin, soğutun, sonra 100 mL suyla seyreltin ve iyi karıştırın. | – |
| 2 | Potasyum Hidroksit Çözümü (5 g/L) | 5 g potasyum hidroksit ağırlayın, 1000 mL suda çözün ve iyi karıştırın. | – |
| 3 | Potasyum Borohidrit Alkali Çözüm (15 g / L) | 15 g potasyum borohidrit ağırlık verin, potasyum hidroksit çözümünde (5 g / L) çözün ve iyi karıştırın. | Kullanmadan önce taze hazırlayın |
| 4 | Hidroklorik Asit (10 90) | 50 ml hidroklorik asit ölçün, yavaş yavaş 450 ml suya ekleyin ve iyi karıştırın. |
3. Operasyon Prosedürü
3.1 Örnek Hazırlama
3.1.1 Test Çözümünün Hazırlanması
Örneği ezip homojenize edin ve temiz bir örnek torbasında saklayın.
0.2 g ağırlık – 0,3 g örnek (0,001 g'e kadar doğru), sindirim tübüne yerleştirin, 8 mL nitrik asit ve 1 mL hidrojen peroksit ekleyin, sallayın ve iyi karıştırın, sonra mikrodalga sindirim aletinde sindirin. Önerilen mikrodalga sindirim koşulları aşağıdaki tabloda gösterilmiştir (sindirim koşulları farklı aletlere göre bağımsız olarak ayarlanabilir). Sindirimden sonra sindirim tüpünü soğutun, ardından sindirim asit sürücü cihazına yerleştirin ve hacim yaklaşık 1 mL olana kadar sürekli olarak 140 °C'de ısıtın (kuruluğa buharlaşmayın). Tüpü çıkarın, 5 mL hidroklorik asit çözümü (6 mol / L) ekleyin, çözüm beyaz dumanlarla açık ve renksiz hale gelene kadar ısıtmaya devam edin, sonra çıkarın ve soğutun. Çözümü 10 mL hacimli bir kolba deiyonlaştırılmış su ile aktarın, işaretlenmiş hacime su ile seyreltin, iyi karıştırın ve test için ayırın. Aynı anda bir reaktif boş testi yapın.
0.2 g ağırlık – 0,3 g örnek (0,001 g'e kadar doğru), sindirim tübüne yerleştirin, 8 mL nitrik asit ve 1 mL hidrojen peroksit ekleyin, sallayın ve iyi karıştırın, sonra mikrodalga sindirim aletinde sindirin. Önerilen mikrodalga sindirim koşulları aşağıdaki tabloda gösterilmiştir (sindirim koşulları farklı aletlere göre bağımsız olarak ayarlanabilir). Sindirimden sonra sindirim tüpünü soğutun, ardından sindirim asit sürücü cihazına yerleştirin ve hacim yaklaşık 1 mL olana kadar sürekli olarak 140 °C'de ısıtın (kuruluğa buharlaşmayın). Tüpü çıkarın, 5 mL hidroklorik asit çözümü (6 mol / L) ekleyin, çözüm beyaz dumanlarla açık ve renksiz hale gelene kadar ısıtmaya devam edin, sonra çıkarın ve soğutun. Çözümü 10 mL hacimli bir kolba deiyonlaştırılmış su ile aktarın, işaretlenmiş hacime su ile seyreltin, iyi karıştırın ve test için ayırın. Aynı anda bir reaktif boş testi yapın.
Mikrodalga Sindirim Sıcaklığı Yükseltme Programı
| Adım | Sıcaklık / °C | Tutma Süresi / dakika |
|---|---|---|
| 1 | 80 | 3 |
| 2 | 120 | 5 |
| 3 | 140 | 5 |
| 4 | 160 | 5 |
| 5 | 180 | 30 |
3.1.2 Standart Çözümlerin Hazırlanması
-
Selenyum Standart Ara Çözümünün Hazırlanması (1 μg / mL):
100 μL selenyum standart çözümünü (1000 μg / mL) 100 mL hacimli bir kolba doğru bir şekilde pipet edin, 20 mL hidroklorik asit ekleyin, işaretlenmiş hacime su ile seyreltin ve iyi karıştırın. -
Selenyum Standart Çalışma Çözümünün Hazırlanması (10 ng / mL):
1,0 mL selenyum standart ara çözümünü (1 μg / mL) 100 mL hacimli bir kolba doğru bir şekilde pipet edin, 20 mL hidroklorik asit ekleyin, işaretlenmiş hacime su ile seyreltin ve test için iyi karıştırın. -
Selenyum Standart Serisinin Hazırlanması:
Cihaz, 0,00 ng/mL, 1,00 ng/mL, 2,00 ng/mL, 4,00 ng/mL, 8,00 ng/mL ve 10,00 ng/mL konsantrasyonları olan standart bir seri hazırlamak için otomatik olarak seyreltilir.
3.2 Örnek Testi
- Test Koşulları
Atomik Floresans Spektrofotometri için Referans Koşulları
| Negatif Yüksek Gerilim (V) | 280 |
|---|---|
| Lamba Akımı (mA) | 50/50 |
| Atomizasyon Sıcaklığı (°C) | 200 |
| Taşıyıcı Gaz Akış Hızı (mL / dakika) | 300 |
| Koruma Gaz Akış Hızı (mL / dakika) | 600 |
| Ölçüm Yöntemi | Standart Eğri Yöntemi |
| Okuma Modu | Zirve Alanı |
| Gecikme Süresi(ler) | 4.0 |
| Okuma Süresi (s) | 18 |
| Örnek Enjeksiyon Hacimi (mL) | 1.0 |
- Örnek testi
Aleti optimal duruma ayarlayın. Taşıyıcı akışı olarak hidroklorik asit (10 90) ve azaltıcı ajan olarak potasyum borohidrür alkali çözüm (15 g / L) kullanın. Taşıyıcı akışının boş ayrımcılık değeri 10.0'dan az olduktan sonra, fluoresans yoğunluğunu belirlemek için selenyum standart çalışma çözümünü enjekte edin. Standart eğrisini kütle konsantrasyonu absisa olarak ve floresan yoğunluğu ordinat olarak çizin.
Standart seri çözümünün belirlenmesi için yapılanlarla aynı deneysel koşullar altında, sırasıyla boş çözüm ve örnek çözümünü alete girin, floresan yoğunluklarını belirleyin ve standart seriyle karşılaştırılarak miktarlanmayı gerçekleştirin.
