
GEL PERMEATION CROMATOGRAPHY(GPC)로 알려진 SIZE EXCLUSION CROMATOGRAPHY(SEC)는 매크로분자를 순수히 수역학적 크기로 분류하는 주요 분석 방법으로 사용됩니다.주요 아이디어는 화학적 차이가 아닌 물리적 차이에 의존합니다. 입자는 고정상의 모공성 설정에서 다양한 배제를 통해 분리됩니다.더 큰 입자가 먼저 나타나기 때문에 그들은 고정 단계에서 구孔에 들어갈 수 없습니다.한편, 더 작은 입자는 그 구孔으로 미끄러지고 열을 따라 더 천천히 움직입니다.이것은 그들이 나가기 전에 더 긴 시간을 가져옵니다.
이 접근법은 중합체, 단백질, 항체 및 나노입자를 연구할 때 SEC에게 특별한 이점을 제공합니다.그것은 자연적인 형태를 변경하거나 화학적 결합을 필요로하지 않고 그렇게 합니다.Held와 Kilz가 지적했듯이, "크기 제외 크로마토그래피는 대분자에 대한 가장 중요한 특성화 기술입니다."
SEC에서 분석 정확성에 중요한 매개 변수는 무엇입니까?
당신은 샘플을 좋은 모양에 유지하기 위해 매우 조심스럽게 모바일 단계를 선택해야합니다.버퍼의 구성은 샘플을 지원해야합니다’s 안정성과 원치 않는 바인딩을 중단합니다.예를 들어 단백질은 이온의 강도와 pH 수준에 강하게 반응합니다.이러한 요소는 직접 그들의 형태를 형성하고 그들이 열에 어떻게 이이이이루어지는지를 형성합니다.특정 유기농 添加剂를 추가하면 특특특정 특특정 유기농 添加剂를 추가하면 특정 특정 유기농 添加剂를 추가하는 것은 특정 특정 유기농 添加剂를이것은 생물학적 중합체와 일할 때 특히 유용합니다.
왜 유량이 최고의 해상도를 위해 최적화되어야합니까?
유량은 분리의 날카성과 과정의 속도에 중요한 역할을 합니다.더 빠른 흐름은 분석에 필요한 시간을 줄일 수 있지만 분리의 명확성을 손상시킬 수 있습니다.이것은 대부분 제외 한계에 가까운 입자에서 발생합니다.반면에, 느린 흐름은 분리의 품질을 향상시키지만 전체 시간을 반반복합니다.그러므로 좋은 중간을 찾아야 합니다.이렇게 하면 효율성을 잃지 않고 강력한 분석 결과를 얻을 수 있습니다.
분자중량 추정에서 교정이 얼마나 중요합니까?
SEC 자체는 정확한 분자량을 제공하지 않습니다.대신 표준 샘플에서 만든 곡선을 사용하여 추측합니다.알려진 표준에 따라 교정함으로써 배출량을 분자량에 연결할 수 있습니다.이것은 Grubisic 방정식과 같은 광범위한 교정 방법을 적용할 때 특히 사실입니다.
SEC는 어떻게 다양한 샘플 유형에 대한 분석 정확성을 향상시킬 수 있습니까?
생물제품의 성장에서 단백질 클럼프를 발견하는 것은 중요한 품질 검사로서 뛰어난다.SEC는 생물제약품질을 통제하는 데 매우 중요한 고분자량 집합물을 수집합니다.그것은 쌍이나 더 큰 그룹에서 단체체를 분해하며, 안정적인 단백질이 다양한 설정에서 얼마나 유지되는지 평가하는 데 도움이 됩니다.또한 신중한 측정을 통해 주요 단일 형태를 분해된 비트에서 구별합니다.
SEC는 Nanoparticles 및 Bioconjugates에 대한 어떤 이점을 제공합니까?
나노입자와 생물 연합물은 다양한 구성으로 인해 어려운 문제를 가져옵니다.SEC는 수력 역학 반경에 따라 분류하기 때문에 이 영역에서 빛나는 것입니다.특히, 그것은 나노 입자를 수력 역학 반경에 따라 분할하여 크기의 균등성을 확인하는 데 도움이 됩니다.항체-약물 연합물이나 PEG와 연결된 단백질과 같은 것들의 경우, 연결되지 않은 버전과 연결된 버전을 구분할 수 있습니다.
고정밀 SEC 설정에서는 어떤 기계적 요인을 고려해야 합니까?

열을 선택하는 것은 예상되는 분자량 범위와 화학적으로 얼마나 잘 일치하는지에 따라 달라집니다.열은 가능한 최고의 명확성을 달성하기 위해 예상된 분자량 범위에 적합해야합니다.또한, 물 기반 시스템을 위한 설정은 단백질과 다당산화물에 가장 잘 작동합니다.반대로, 유기 용매를 처리하는 열은 PMMA 또는 폴리스티렌과 같은 인공 중합체에 적합합니다.열의 길이와 폭은 또한 분리의 날카성과 얼마나 많은 샘플을 한 번에 처리할 수 있는지에 영향을 미칩니다.
어떤 감지기가 SEC 해석에 가치를 추가합니까?
SEC는 종종 다양한 탐지기와 함께 결과를 이해하기 쉬워 합니다.
refractive index (RI): 이것은 색깔 흡수 부분이 부족한 중합체, 탄수화물 및 단백질에 대한 광범위한 탐지를 제공합니다.
UV/Vis: 샘플이 빛을 흡수하는 방법을 사용하여 대상 검출을 허용합니다.
MALS: 이것은 교정을 위해 표준 샘플을 필요로하지 않고 진정한 분자량을 제공합니다.
이들을 함께 실행하면 동시에 데이터를 수집할 수 있습니다.그 결과 농도 수준을 구조적 특징에 연결하여 한 번의 테스트 실행으로부터 완전히 파괴될 수 있습니다.이 결합된 접근 방식은 얻은 데이터의 신뢰성을 크게 강화합니다.
누가 신뢰할 수 있고 혁신적인 SEC 계기 솔루션을 제공할 수 있습니까?
최고의 정확도와 유연성으로 SEC를 실험실에 가져오고 싶다면, 페리 연구 실험실과 산업 환경을 위해 설계된 뛰어난 색상 분석 도구를 제공합니다.1991년에 과학 도구에 초점을 맞춘 하이테크 회사로 설립된 PERSEE는 HPLC, GC, FTIRUV/Vis 분광광학, 및 원자 분광학연구에 대한 강한 초점은 명확하게 보여줍니다. 직원의 30% 이상이 R&에서 일합니다.D, 항상 시간이 지남에 따라 변화하는 것에 따라 사용자가 필요로 하는 것을 충족시키기 위해 제품을 개선합니다.
그들의 라인업 안에서, The L600 고성능 액체 크로마토그래피 시스템 정말 나타나고 있습니다.그 견고한 구조는 세부 SEC 작업에 완벽합니다.이 시스템은 분자 크기에 따라 분리에서 반복 가능한 결과를 얻기 위해 정확한 흐름 제어를 보장합니다.또한 PERSEE는 세계 과학자들을 설치, 훈련 및 유지보수에 대한 실제 도움으로 지원합니다.그들은 전 세계 유통업체의 견고한 네트워크를 통해 이것을 수행하여 지원을 쉽게 접근할 수 있습니다.
SEC는 산업 전체에서 분석 정밀성에 어떻게 기여합니까?
SEC’분자의 크기에 따라 분자를 분리하는 기술은 모두 원래 조건을 유지하면서 순수성을 확인하는 필수적인 도구로 변화합니다.그것은 다양한 분자 유형 사이의 차이를 신뢰할 수 있게 발견하여 순수성 검사의 강도를 여러 가지 방법으로 높입니다.SEC는 재료 과학에서 폴리머를 특징화하고, 생물제품에서 집합물을 찾고, 나노 의학에서 나노 입자를 크기화하는 데 그 광범위한 유용성을 보여줍니다.제약, 재료 과학, 생물 기술을 포함한 많은 분야에 부드럽게 적합합니다.이러한 분야에서 다양한 요구를 일관된 성능으로 처리하고, 각각의 특정 도전에 적응하면서 높은 정확도와 신뢰성을 유지합니다.SEC를 MALS 또는 UV 같은 도구와 연결하면 양을 측정하는 능력이 더 높습니다.이 페어링은 당신이 얻는 숫자의 신뢰성을 높여줍니다.
FAQ는
Q1: 크기 제외 크로마토그래피는 다른 크로마토그래피와 어떻게 다릅니까? 기술?
A1: 화학적 상호 작용에 의존하는 이온 교환 또는 역단계 염색법과는 달리, SEC는 다공성 매트릭스를 사용하여 유체역학적 크기에 따라 분석물을 분리합니다.
Q2: SEC를 사용하여 정확한 결과를 달성하는 데 일반적인 과제는 무엇입니까?
A2: 도전은 정지 단계와의 비 특정 상호 작용, 복잡한 샘플에 대한 부적절한 교정 표준, 그리고 최적의 유량 또는 이동 단계 조건을 포함합니다.
Q3: 크기 제외 크로마토그래피는 수성 및 유기 모두를 위해 사용될 수 있습니다 시스템?
A3: 예, 사용된 고정 단계 재료에 따라;물 호환성 열은 단백질과 다당산화물에 적합하지만 유기 호환성 열은 폴리스티렌이나 PMMA와 같은 합성 중합체에 사용됩니다.