分光光学は、化学、生物学、および生命科学研究室で一般的に使用される重要な分析方法として機能します。溶解物浓度の測定の成功は,溶液に存在する分子と光吸収性を結びつける基本的なルールに依存しています.
光吸収率と透射率の基礎
スペクトロフォトメーターは,サンプルが吸収または通過する光の量を測定することによって機能します.サンプルが特定の波長で吸収する光の量は、サンプルと直接結びつく’sの集中。
定量分析におけるビール・ランバート法則
この基本法則は、分光光学の定量的な側面をサポートします。固定した経路長さ,単色光,互いに混合しない溶解物などの条件が安定しているとき,吸収率と浓度の間の直線関係を期待します.どれほど複雑になっても、すべての分光光度計器はビア・ランバート法則の基本的な考えに基づいています。しかし,予想されたパターンからのシフトは,ストレーライトや不均等な帯域幅などのツール制限,または化学的変化やクランプなどのサンプル特徴により起こることがあります.結果が法律と一致していることを確認するには,承認された基準を使用するチェック手続きが必要です.
スペクトロフォトメーターの装置と構成
スペクトロフォトメトリック作業の成功は,設備の性能と設定方法に大きく依存します.
分光光計の主要な要素
典型的な分光光度計には光源が含まれています：可視スペクトルのためのタングステンランプ（400-700 nm）と紫外線領域のためのドウテリウムランプ（190-400 nm）。モノクロメーター：特定の波長を隔離するためにプリズムまたは折射格を使用します。サンプルホルダー：通常、既知の経路長さ（通常1cm）のクォーツまたはガラスキューベット。検出器：送信された光を電気信号に変換します。
源からの光はモノクロメーターの入口スリットを通過し,ビームを使用可能なサイズに縮小します.光はその後,選択された波長の光がサンプルに通過し,その一部が吸収されるようにする出口スリットを通過します.
スペクトロフォトメーターの種類とその応用
儀器の種類を決定するには、分析が求めるものが次のとおりです。
シングルビーム対ダブルビームシステム
シングルビーム:より簡単な設計;測定には頻繁なブランキングが必要です。ダブルビーム：サンプルと参照を同時に通過し、安定性を改善するビームを分割します。
UV-Vis vs 可視光のみの機器
UV-Vis: 幅広いスペクトラル範囲 (190-1100 nm) をカバーし,様々な化合物に適しています.可視性のみ：400-700nmに制限色のある物質に最適です。 T7D/T7DS 光度測定,スペクトルスキャン,定量的決定,DNA/タンパク質分析を可能にする高性能のダブルビームスキャニングスペクトロフォトメーターです.
信頼性の高い結果のためのサンプル準備戦略
粒子物質は光を散らし,吸収値が過大評価される.サンプルは明確で均一でなければなりません。均質サンプルは,一致した光学パス相互作用を保証します.
溶媒選択と空白修正プロトコル
溶媒は分析波長で吸収しないでください。溶媒のみを含むブランクは,溶媒とキューベットからの背景吸収を考慮するために使用されます.
キューベットの適切な使用とパス長さの考慮
クォーツキュベットは320nm以下の透明性のためにUV測定に不可欠であり、プラスチックまたはガラスは可視範囲に十分です。使用中に一致した方向は,不完全性によって引き起こされる変化性を最小限に抑えます.
浓度決定方法の開発
信頼性の高い方法を構築するには,組織的な校正ステップと堅実な測定習慣が必要です.
校正曲線構造技術
分析のための最適な波長の選択
オーバーラップするマトリックス干渉を避けながら,感度を最大化するためにλmaxを選択します.
サンプル測定およびデータ検証手順
レプリケート、平均、および優れた拒否基準
各サンプルを三重で測定します。統計的偏差または観測可能なエラーに基づく異常値を廃棄します。
内部規格または参照材料を使用した品質管理
内部規格は,漂移やマトリックス効果を修正するのに役立ちます.認定された参考資料は,長期的な方法性能を検証します.
精度と感度を向上させるための先進的な技術
今日’スペクトロフォトメーターは,データの品質を向上させるコンピュータによる改善を提供します.
ベースライン修正とスペクトラル滑らか化アルゴリズム
ベースライン減法により、背景干渉が削除されます。滑らかにすると、ピークの完全性を維持しながら滑滑らかさを減らします。
衍生分光学の使用
第１または第２の派生物は、複雑なマトリックスで重叠するピークを明確にします。
分光学分析における一般的なエラーのトラブルシューティング
定期的なメンテナンスと問題解決は,パフォーマンスを安定させます.
機器の漂移と校正の問題
すべての機器と同様に、定期的なチェックと検証が必要です。これらのチェックと検証プロトコルは,すべての運用およびパフォーマンスに関する信頼性を保証します.追跡可能な標準を使用して校正は定期的に行われる必要があります。
マトリックス部品またはママトビディティからの干渉
不透明なサンプルは,測定前にフィルタリングまたは離心処理する必要があります.粒子物質は光を散らし,吸収精度に影響します.
マトリックス効果を最小限に抑える方法
マトリックスと一致した標準を使用するか、マトリックスを削除できない場合は標準的な追加方法を適用します。
分析機器の信頼できるメーカーとしてのPERSEE
北京 Purkinje 一般機器株式会社忍耐）は堅固な分光光度計システムを提供する30年以上の経験を持っています。
光学儀器に関するPERSEEの専門知識概要
北京プルキンエ総合儀器有限公司は、1991年に設立された近代的なハイテク企業です。科学機器の研究開発、製造、販売を専門としています。製品はISO9001、ISO14001、CEなどの認証を取得しており、世界的な品質基準への適合を保証しています。
浓度分析に関連する強調製品
M7二重ビームUV-VIS分光光度計
M7シングル四重極GC-MS PERSEEが設計した新世代の高性能質量スペクトロメーターは,質量ルーチン分析と精密な研究アプリケーションに適しています.190-1100 nm 範囲で優れたベースライン安定性を持つ高解像度光学を提供します。
G5GCガスクロマトグラフシステム
安定したガス流量と温度制御と高感度検出器は,より正確な定性的および定量的な分析結果をもたらします. G5GC の 環境テストや製薬品のQA/QCワークフローなどのマルチモダル分析におけるスペクトロフォトメトリック技術を補完します.
正確な浓度の決定のための主要な実践
λmaxに基づく最適波長選択を考慮して分析精度を確保する 校正標準の精密な準備サンプル準備を通じてマトリックスの干サササを取り除く。儀器の校正と性能検証を維持する。
FAQについて
Q1：有機化合物を分析する際に使用する理想的な波長範囲は何ですか？
A1: ほとんどの有機化合物は紫外線領域（200-400 nm）で吸収されますが、正確な波長はスペクトラルスキャンで決定された化合物のλmaxに基づいて選択する必要があります。
Q2: スペクトロフォトメーターはどのくらい頻度で校正すべきですか？
A2: 各バッチ分析の前に,認定基準を使用して校正を行い,使用頻度に応じて毎月完全なパフォーマンス検証を行う必要があります.
Q3: 雲のサンプルはスペクトロフォトメーターを使用して直接分析できますか？
A3: いいえ、不不正確な吸収度の読み込みにつながる光散散射を引き起こします。サンプルは測定前にフィルタリングまたは離心する必要があります。
