1. Gambaran Umum Metode
Setelah sampel dicerna dengan pemanasan dengan asam, selenium heksavalen dalam sampel dikurangi menjadi selenium tetravalen dalam medium asam klorhidrat 6 mol / L. Kalium borohidrida digunakan sebagai agen reduksi untuk mengurangi selenium tetravalen menjadi hidrogen selenida dalam medium asam klorhidrat. Hidrogen selenida dibawa ke dalam atomizer oleh gas pembawa (argon) untuk atomisasi. Di bawah radiasi lampu katoda berongga selenium, atom selenium dalam keadaan dasar dirangsang ke keadaan energi tinggi. Ketika dideaktifkan dan kembali ke keadaan dasar, mereka memancarkan fluoresensi dengan panjang gelombang karakteristik. Intensitas fluoresensi proporsional dengan kandungan selenium, dan kuantifikasi dilakukan dengan perbandingan dengan seri standar.
2. Instrumen dan Reagen
2.1 Instrumen dan Peralatan
2.1.1 Instrumen Pengujian
| Serial No. | Nama | Kuantitas | Persyaratan Teknis | Aksesoris |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Spektrofotometer Fluoresen Atom | 1 set | – | Lampu Katoda Berberongga Selenium |
| 2 | Argon Gas | 1 silinder | Kemurnian ≥ 99,999% | – |
2.1.2 Sampel Peralatan Praperawatan
| Serial No. | Nama | Kuantitas | Persyaratan Teknis | Aksesoris |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Keseimbangan Elektronik | 1 set | Sensitivitas: 1 mg | – |
| 2 | Sistem pencernaan gelombang mikro | 1 set | – | Politetrafluoroetilena (PTFE) tangki dalam pencernaan, perangkat penggerak asam pencernaan |
| 3 | Hot Plate yang dapat disesuaikan | 1 set | – | – |
| 4 | Mikropipet | 1 masing-masing (100 μL ~ 1000 μL, 1000 μL ~ 5000 μL) | – | – |
| 5 | Tabung Kolorimetrik | Beberapa (10 ml) | – | – |
2.2 Reagen
2.2.1 Reagen mentah
| Serial No. | Nama | Persyaratan Teknis | Perkataan |
|---|---|---|---|
| 1 | Asam Nitrat | Reagen yang dijamin (GR) | – |
| 2 | Hidrogen Peroksida | Reagen yang dijamin (GR) | – |
| 3 | Asam hidroklorik | Reagen yang dijamin (GR) | – |
| 4 | Kalium Hidroksida | Reagen Analisis (AR) | – |
| 5 | Kalium Borohidrida | Reagen Analisis (AR) | – |
2.2 Reagen yang disiapkan
| Serial No. | Nama | Metode Persiapan | Perkataan |
|---|---|---|---|
| 1 | Larutan Asam Klorihidrok (6 mol / L) | Ukur 50 mL asam klorida, perlahan-lahan tambahkan ke 40 mL air, dingin, lalu cairkan hingga 100 mL dengan air dan campur dengan baik. | – |
| 2 | Solusi Kalium Hidroksida (5 g / L) | Berat 5 g kalium hidroksida, larutkan dalam 1000 mL air, dan campur dengan baik. | – |
| 3 | Solusi Alkali Kalium Borohidrida (15 g / L) | Berat 15 g kalium borohidrida, larutkan dalam larutan kalium hidroksida (5 g / L), dan campur dengan baik. | Siapkan segar sebelum digunakan |
| 4 | Asam hidroklorat (10 90) | Ukur 50 mL asam klorida, perlahan-lahan tambahkan ke 450 mL air, dan campur dengan baik. |
3. Prosedur Operasi
3.1 Persiapan Sampel
3.1.1 Persiapan Solusi Uji
Hancurkan dan homogenisasi sampel, dan simpan dalam kantong sampel yang bersih.
Berat 0,2 g – 0,3 g sampel (akurat hingga 0,001 g), letakkan ke dalam tabung pencernaan, tambahkan 8 mL asam nitrat dan 1 mL hidrogen peroksida, goyang dan campur dengan baik, lalu mencerna dalam instrumen pencernaan gelombang mikro. Kondisi pencernaan gelombang mikro yang direkomendasikan ditunjukkan dalam tabel di bawah ini (kondisi pencernaan dapat diatur secara independen sesuai dengan instrumen yang berbeda). Setelah pencernaan, dinginkan tabung pencernaan, lalu letakkan di perangkat penggerak asam pencernaan dan panas terus-menerus pada 140 ° C sampai volume sekitar 1 mL (jangan menguap ke kekeringan). Hapus tabung, tambahkan 5 mL larutan asam klorida (6 mol / L), lanjutkan pemanasan sampai larutan menjadi jelas dan tidak berwarna dengan asap putih, lalu hapus dan dingin. Transfer larutan ke botol volumetrik 10 mL dengan air deionisasi, cairkan ke volume yang ditandai dengan air, campur dengan baik, dan simpan untuk pengujian. Melakukan tes kosong reagen secara bersamaan.
Berat 0,2 g – 0,3 g sampel (akurat hingga 0,001 g), letakkan ke dalam tabung pencernaan, tambahkan 8 mL asam nitrat dan 1 mL hidrogen peroksida, goyang dan campur dengan baik, lalu mencerna dalam instrumen pencernaan gelombang mikro. Kondisi pencernaan gelombang mikro yang direkomendasikan ditunjukkan dalam tabel di bawah ini (kondisi pencernaan dapat diatur secara independen sesuai dengan instrumen yang berbeda). Setelah pencernaan, dinginkan tabung pencernaan, lalu letakkan di perangkat penggerak asam pencernaan dan panas terus-menerus pada 140 ° C sampai volume sekitar 1 mL (jangan menguap ke kekeringan). Hapus tabung, tambahkan 5 mL larutan asam klorida (6 mol / L), lanjutkan pemanasan sampai larutan menjadi jelas dan tidak berwarna dengan asap putih, lalu hapus dan dingin. Transfer larutan ke botol volumetrik 10 mL dengan air deionisasi, cairkan ke volume yang ditandai dengan air, campur dengan baik, dan simpan untuk pengujian. Melakukan tes kosong reagen secara bersamaan.
Program Pencernan Microwave Meningkatkan Suhu
| Langkah | suhu / ° C | Waktu pemegang / menit |
|---|---|---|
| 1 | 80 | 3 |
| 2 | 120 | 5 |
| 3 | 140 | 5 |
| 4 | 160 | 5 |
| 5 | 180 | 30 |
3.1.2 Persiapan Solusi Standar
-
Persiapan Selenium Standard Intermediate Solution (1 μg / mL):
Pipet 100 μL larutan standar selenium (1000 μg / mL) secara akurat ke dalam botol volumetrik 100 mL, tambahkan 20 mL asam klorhidrat, cairkan ke volume yang ditandai dengan air, dan campurkan dengan baik. -
Persiapan Solusi Kerja Standar Selenium (10 ng / mL):
Pipet secara akurat 1,0 mL larutan menengah standar selenium (1 μg / mL) ke dalam botol volumetrik 100 mL, tambahkan 20 mL asam klorhidrat, cairkan ke volume yang ditandai dengan air, dan campurkan dengan baik untuk pengujian. -
Persiapan Seri Standar Selenium:
Instrumen secara otomatis diencerkan untuk menyiapkan seri standar dengan konsentrasi 0,00 ng / mL, 1,00 ng / mL, 2,00 ng / mL, 4,00 ng / mL, 8,00 ng / mL, dan 10,00 ng / mL.
3.2 Pengujian Sampel
- Kondisi Pengujian
Kondisi referensi untuk spektrofotometer fluoresensi atom
| Tegangan Tinggi Negatif (V) | 280 |
|---|---|
| Lampu arus (mA) | 50/50 |
| Suhu atomisasi (° C) | 200 |
| Tingkat Aliran Gas Pembawa (mL / min) | 300 |
| Tingkat Aliran Gas Perisai (mL / min) | 600 |
| Metode pengukuran | Metode Kurva Standar |
| Mode Membaca | Daerah Puncak |
| Waktu penundaan (s) | 4.0 |
| Waktu membaca (s) | 18 |
| Volume Injeksi Sampel (mL) | 1.0 |
- Pengujian sampel
Sesuaikan instrumen ke keadaan optimal. Gunakan asam klorida (10 90) sebagai aliran pembawa dan larutan alkali kalium borohidrida (15 g / L) sebagai agen reduksi. Setelah nilai diskriminasi kosong aliran pembawa kurang dari 10,0, suntikan larutan kerja standar selenium untuk menentukan intensitas fluoresensinya. Plot kurva standar dengan konsentrasi massa sebagai absisisa dan intensitas fluoresensi sebagai ordinat.
Dalam kondisi eksperimental yang sama dengan yang untuk menentukan larutan seri standar, memperkenalkan larutan kosong dan larutan sampel ke dalam instrumen masing-masing, menentukan intensitas fluoresensi mereka, dan melakukan kuantifikasi dengan perbandingan dengan seri standar.
