1 alcance
\nEste est\u00e1ndar especifica el m\u00e9todo de prueba de residuos de clorpirifos en alimentos por cromatograf\u00eda de gas: detector fotom\u00e9trico de llama (GC -FPD) y espectrometr\u00eda de masas de cromatograf\u00eda de gases (GC -MS).
\nEste est\u00e1ndar es aplicable a la determinaci\u00f3n y confirmaci\u00f3n del contenido de residuos de clorpirifos en ma\u00edz, rice marr\u00f3n, cebolleta, espinacas, chile, naranja, manzana, n\u00facleo de pino, t\u00e9, miel, pescado, miel, cerdo, ri\u00f1\u00f3n de pollo e h\u00edgado de pollo.<\/p>\n
2 Principios<\/p>\n
Naranja u otra muestra vegetal se extrae con acetato de etilo.<\/p>\n
3 reactivos y materiales<\/p>\n
Todos los reactivos utilizados deben ser anal\u00edticamente puros a menos que se especifique lo contrario.
\n3.1 Acetona: Grado de residuos.<\/p>\n
3.2 Diclorometano: Grado de residuos.<\/p>\n
3.3 ciclohexano: grado de residuos
\n3.4 Acetato de etilo: grado de residuos.<\/p>\n
3.5 N-hexano: grado de residuos.<\/p>\n
3.6 Soluci\u00f3n acuosa de cloruro de sodio.<\/p>\n
3.7 Sulfato de sodio anhidro: encendido a 650 \u00b0 C durante 4 h, y luego se almacena en un recipiente bien sellado.
\n3.8 Soluci\u00f3n acuosa de cloruro de sodio (5%): pese el cloruro de sodio 5.0 g.
\n3.9 Acetato de etilo-n-hexano (1+1 V\/V) volumen 100 mL de acetato de etilo en un matraz Erlenmeyer de 250 mL. luego agregue 100 mL de n-hexano, m\u00e9zclelos.
\n3.10 Acetato de etilo-ciclohexano (1+1V\/V): volumen100 ml de acetato de etilo en 250 ml de frasco Erlenmeyer, luego agregue 100 ml de ciclohexano, mezcle.
\n3.11 Est\u00e1ndar de clorpirifos (C9 H11C13 NO3 PS, CAS No. 2921-88-2) Pureza> 98%.<\/p>\n
3.12 Soluci\u00f3n est\u00e1ndar est\u00e1ndar: pesar con precisi\u00f3n cierta cantidad de clorpirifos est\u00e1ndar y DIS: resuelva con un peque\u00f1o volumen de acetato de etilo.
\n3. 13 Soluci\u00f3n de trabajo est\u00e1ndar: diluya la soluci\u00f3n madre est\u00e1ndar con acetato de etilo a la concentraci\u00f3n requerida para hacer la soluci\u00f3n de trabajo est\u00e1ndar.
\n3.14 Tubo de Florisil SPE: Florisil, 500 mg, 6 ml o equivalente.<\/p>\n
3. 15 Tubo SPE de carbono activo: envi -carb.250 mg, 6 ml o equivalente.
\n3.16 Filtro de membrana: 0. 45 um.<\/p>\n
3. 17 carbono graf\u00edtico: 60 malla ~ 80 malla<\/p>\n
4 Aparatos y equipos<\/p>\n
4. 1 GC: cromatograf\u00eda de gases equipado con FPD, 526 nm.
\n4.2 GC -MS: equipado con fuente de electroimpacto (EL).<\/p>\n
4. 3 Centr\u00edfuga: 4 000 r\/min.<\/p>\n
4.4 GPC: equipado con bomba isocr\u00e1tica y colector de fracci\u00f3n.<\/p>\n
4. 5 homogeneizador.<\/p>\n
4. 6 Evaporador de vac\u00edo rotativo.<\/p>\n
4. 7 Frasco Erlenmeyer de 7 parada: 250 ml<\/p>\n
4.8 ENDEMA DE OPORTACI\u00d3N: 250 ml<\/p>\n
4.9 Botella concentrada: 50 ml y 250 ml<\/p>\n
4. 10 Balance electr\u00f3nico: preciso a 0. 000 1 g.<\/p>\n
4. 11 Tubo de centr\u00edfuga de pl\u00e1stico: 50 ml<\/p>\n
<\/p>\n
5 Preparaci\u00f3n y almacenamiento de la muestra de prueba
\n5.1 Preparaci\u00f3n de la muestra de prueba<\/p>\n
5.1.1 ma\u00edz, arroz integral, t\u00e9, nuez de pi\u00f1\u00f3n, man\u00ed y miel<\/p>\n
Tome aproximadamente 500 g de muestra representativa.<\/p>\n
5.1.2 Naranja, manzana, espinacas y ceboll\u00edn<\/p>\n
Tome aproximadamente 500 g de muestra representativa.
\n5.1.3 Cerdo.<\/p>\n
Tome aproximadamente 1 kg de muestra representativa.
\n5.1.4 chile<\/p>\n
Tome aproximadamente 500 g de muestra representativa.
\n5.2 Almacenamiento de la muestra de prueba<\/p>\n
Las muestras de prueba de cereales, nueces, t\u00e9.
\n6 procedimiento<\/p>\n
6.1 extracci\u00f3n<\/p>\n
6.1.1 Naranja, manzana, espinacas, ceboll\u00edn, ma\u00edz, marr\u00f3n -rode y chile<\/p>\n
Pese 10 g (preciso a 0.01 g) de la muestra de prueba en un tubo de centr\u00edfuga de 50 ml (4. 11).<\/p>\n
6.1.2 t\u00e9<\/p>\n
Pese 5 g (preciso a 0.01 g) de la muestra de prueba en un tubo de centr\u00edfuga de pl\u00e1stico de 50 ml.
\n6.1.3 Cerdo, h\u00edgado de pollo, ri\u00f1\u00f3n de pollo, pescado, n\u00facleo de pino y man\u00ed<\/p>\n
Pese 20 g (preciso a 0.01 g) (5 g para el n\u00facleo de Pine -Net y el man\u00ed) de la muestra de prueba en un matraz Erlenmeyer de 250 ml.
\nTransfiera el extracto a un embudo de separaci\u00f3n de 250 ml.
\n6.2 Limpieza -Up<\/p>\n
6. 2. 1 GPC Cleaning -Up<\/p>\n
6.2.<\/p>\n
a) Columna GPC: 700 mm x 25 mm (i. D.) Bio Beads S-X3 o equivalente;<\/p>\n
b) Fase m\u00f3vil: acetato de ciclohexano -etil (1+1)<\/p>\n
c) Caudal: 4. 7mL\/min:<\/p>\n
d) Volumen de inyecci\u00f3n en el bucle de muestra: 10 ml:
\nE) Tiempo de pre-rinsing: 10 min:<\/p>\n
f) GPC Tiempo de equilibrio: 5 min:<\/p>\n
g) Tiempo de recolecci\u00f3n de los eluados: 22 min ~ 31 min.
\na) Columna cromatogr\u00e1fica: columna capilar de s\u00edlice HP -5, 30 m x 0. 25 mm (i. d.) Grosor de la pel\u00edcula 0. 25 U M, o equivalente:<\/p>\n
b) Temperatura de la columna: 50 \u00b0C (mantener 1 min) (30 \u00b0C\/min) \u2013 180 \u00b0C (mantener 1 min) (10 \u00b0C\/min) \u2013 250 \u00b0C (mantener 10 min).
\nc) Temperatura del puerto de inyecci\u00f3n: 250 C:<\/p>\n
d) Temperatura de la interfaz: 250 C:<\/p>\n
e) Gas portador: Nitr\u00f3geno, pureza > 99,999%, caudal 1,0 mL\/min:<\/p>\n
f) volumen de inyecci\u00f3n: 1 \u03bcl;<\/p>\n
g) Modo de inyecci\u00f3n: sin divisi\u00f3n.<\/p>\n
6.3.2 Condiciones de funcionamiento de GC -MS<\/p>\n
A) Columna cromatogr\u00e1fica: columna capilar HP -5 de s\u00edlice.<\/p>\n
b) Temperatura de la columna: 50 \u00b0C (mantener 2 min) (20 \u00b0C\/min) \u2013 200 \u00b0C (mantener 1 min) (5 \u00b0C\/min) \u2013 270 \u00b0C (mantener 18 min).
\nc) Temperatura del puerto de inyecci\u00f3n: 280 \u00b0 C<\/p>\n
d) Temperatura de la interfaz: 280 \u00b0 C:<\/p>\n
e) Gas portador: helio.<\/p>\n
f) Volumen de inyecci\u00f3n: 1 UL<\/p>\n
g) Modo de inyecci\u00f3n: sin divisi\u00f3n.<\/p>\n
h) Modo de ionizaci\u00f3n de electrones: EL:<\/p>\n
i) Energ\u00eda de ionizaci\u00f3n: 70 eV:<\/p>\n
j) Modo de determinaci\u00f3n: SIM;<\/p>\n
k) Iones de monitoreo seleccionados (m\/z); el ion de cuantificaci\u00f3n es 197 y los iones de confirmaci\u00f3n son 258, 286, 314:
\nl) Retraso del solvente 9. 0 min.
\n6.3.3 Determinaci\u00f3n de GC<\/p>\n
De acuerdo con el contenido aproximado de clorpirifos, seleccione una soluci\u00f3n de trabajo est\u00e1ndar que tenga una concentraci\u00f3n similar de la soluci\u00f3n de muestra.